Estudo do papel da proteína HSP27/25 na ação da prolactina humana recombinante em células beta pancreáticas (2013)
- Authors:
- Autor USP: MANSANO, ROSANGELA APARECIDA WAILEMANN - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: BIOLOGIA MOLECULAR; APOPTOSE (PATOLOGIA); DIABETES MELLITUS; PROLACTINA; PÂNCREAS
- Language: Português
- Abstract: Um dos objetivos no tratamento de Diabetes mellitus é aumentar a função, proliferação e sobrevivência de células beta pancreáticas, pois o transplante de ilhotas pancreáticas é severamente limitado pela escassez de doadores de órgãos. Nós mostramos que prolactina recombinante humana (rhPRL) apresenta efeitos benéficos em células beta, inibindo a apoptose. Recentemente reportamos o aumento dos níveis de expressão da proteína antiapoptótica HSP27/25, regulada por rhPRL em ilhotas humanas. Nosso objetivo é explorar o papel de HSP27/25 na citoproteção induzida por prolactina em células beta. Métodos: Células MIN6 parentais e silenciadas para HSP25 foram privadas de soro por 24h e cultivadas na presença ou ausência de rhPRL (300ng/mL). Posteriormente foram tratadas na presença ou ausência de uma combinação de citocinas (TNF-α, INF-γ e IL-1β) por diferentes períodos de tempo. A apoptose foi avaliada usando-se análise por citometria de fluxo. Os níveis de expressão gênica de HSP27/25 e membros da família BCL-2, da expressão proteica de membros desta mesma família, além de Caspase-9, Smac-Diablo HSP27/25, HSTF1, pP38 e pSTAT1 foram analisados por Westen blot. Ainda, foram avaliadas a atividade de Caspase-8 e -3, por ensaios fluorimétricos. Após o tratamento com rhPRL e citocinas, a proporção de núcleos fragmentados aumentou em células silenciadas para HSP25 (p<0,05), quando comparadas com células controles. A inibição da atividade de Caspase-3 e -8, tanto quanto os níveis de expressão proteica de caspase-9, por rhPRL e o aumento da razão de expressão Bcl-2/Bax e ´BclxIND.L´/Bax foram revertidos em células silenciadas (p<0,05). Além disso, a cinética dos níveis de expressão de HSP27/25 e HSTF1 foram estudadas em culturas de ilhotas pancreáticas humanas, mostrando que enquanto HSTF1 apresenta um aumento significativo (p<0,01) nos níveis de expressão proteica após 10minde tratamento com rhPRL, HSP27 alcançou seu nível máximo após 2h do tratamento hormonal. Adicionalmente, foi detectado um aumento significante (p<0,05) nos níveis de fosforilação de STAT1 e de p38, após 10min, atingindo o pico de expressão após 30min (p<0,01) do tratamento com rhPRL. Estes estudos demonstram o papel chave de HSP27/25 sobre os efeitos citoprotetores induzidos por rhPRL, desde que a ausência desta proteína aboliu completamente os efeitos benéficos induzidos por PRL sobre a morte de células beta. Ainda, nós fornecemos pela primeira vez, evidências da corregulação de HSP27 e HSTF1 induzidas por rhPRL em células humanas pancreáticas, que pode estar sendo mediada pela ativação de STAT1 e p38. Coletivamente, nossos resultados podem conduzir para a atenuação da morte de células beta por meio da regulação de uma via de proteção endógena, a qual é independente da modulação do sistema imunológico
- Imprenta:
- Data da defesa: 13.08.2013
-
ABNT
MANSANO, Rosangela Aparecida Wailemann. Estudo do papel da proteína HSP27/25 na ação da prolactina humana recombinante em células beta pancreáticas. 2013. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2013. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-22102013-112950/. Acesso em: 01 jan. 2026. -
APA
Mansano, R. A. W. (2013). Estudo do papel da proteína HSP27/25 na ação da prolactina humana recombinante em células beta pancreáticas (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-22102013-112950/ -
NLM
Mansano RAW. Estudo do papel da proteína HSP27/25 na ação da prolactina humana recombinante em células beta pancreáticas [Internet]. 2013 ;[citado 2026 jan. 01 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-22102013-112950/ -
Vancouver
Mansano RAW. Estudo do papel da proteína HSP27/25 na ação da prolactina humana recombinante em células beta pancreáticas [Internet]. 2013 ;[citado 2026 jan. 01 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-22102013-112950/
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas
