Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real (2011)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, ALEXANDRA ROSA DA - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- Sigla do Departamento: VPS
- Subjects: CULTURA DE CÉLULAS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; VACINAS
- Keywords: Canine Parvovirus; DNA sequencing; Parvovírus canino; PCR; PCR; PCR- tempo real; Real-time PCR; Replicação em cultivo celular; Replication in cell culture; Sequenciamento
- Language: Português
- Abstract: No presente estudo, foi inicialmente padronizada uma PCR para detecção do DNA viral da semente de Parvovírus Canino utilizado na vacina brasileira Imunovet® (VR-953TM), tendo como alvo o gene VP2. O produto de PCR foi submetido ao seqüenciamento a fim de caracterizar geneticamente a semente vacinal. A seguir, foi padronizada uma reação de PCR em tempo real (RT-PCR) para detecção de um fragmento de 119 pb do gene VP2, a qual foi empregada para avaliar a cinética de replicação da amostra vacinal do CPV em diferentes métodos e tempos de cultivo celular. A correlação entre os resultados do título infeccioso das amostras virais e o número de cópias obtido na RT-PCR foi avaliado pelo Coeficiente de Correlação de Pearson. A PCR padronizada apresentou uma sensibilidade analítica de 457 DICC50/mL. O seqüenciamento do produto de PCR revelou que a amostra vacinal é do tipo CPV-2. A RT-PCR padronizada apresentou uma sensibilidade analítica de 1030 cópias de DNA/mL e uma boa especificidade analítica, pois não detectou o DNA de Adenovírus canino tipos 1 e 2 e Herpesvírus Equino tipo 1. A RT-PCR exibiu Coeficientes de Variação de triplicatas intra-ensaio de 0,43% e inter-ensaio de 0,29%. O Coeficiente de Correlação de Pearson entre o título infeccioso das amostras virais e o número de cópias obtido na RT-PCR foi de 0,55, considerado moderadamente positivo. Considerando que a região alvo da RT-PCR padronizada apresentou 100% de identidade com 93,52% (159/170) das amostras pesquisadas no GenBank pelo BLAST, a RT-PCR padronizada sugere ter um potencial uso no diagnóstico
- Imprenta:
- Data da defesa: 05.09.2011
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ABNT
SILVA, Alexandra Rosa da. Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real. 2011. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/. Acesso em: 19 set. 2024. -
APA
Silva, A. R. da. (2011). Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/ -
NLM
Silva AR da. Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real [Internet]. 2011 ;[citado 2024 set. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/ -
Vancouver
Silva AR da. Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real [Internet]. 2011 ;[citado 2024 set. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/
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