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Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real (2011)

  • Authors:
  • USP affiliated author: SILVA, ALEXANDRA ROSA DA - FMVZ
  • School: FMVZ
  • Sigla do Departamento: VPS
  • Subjects: CULTURA DE CÉLULAS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; VACINAS
  • Keywords: Canine Parvovirus; DNA sequencing; Parvovírus canino; PCR; PCR; PCR- tempo real; Real-time PCR; Replicação em cultivo celular; Replication in cell culture; Sequenciamento
  • Language: Português
  • Abstract: No presente estudo, foi inicialmente padronizada uma PCR para detecção do DNA viral da semente de Parvovírus Canino utilizado na vacina brasileira Imunovet® (VR-953TM), tendo como alvo o gene VP2. O produto de PCR foi submetido ao seqüenciamento a fim de caracterizar geneticamente a semente vacinal. A seguir, foi padronizada uma reação de PCR em tempo real (RT-PCR) para detecção de um fragmento de 119 pb do gene VP2, a qual foi empregada para avaliar a cinética de replicação da amostra vacinal do CPV em diferentes métodos e tempos de cultivo celular. A correlação entre os resultados do título infeccioso das amostras virais e o número de cópias obtido na RT-PCR foi avaliado pelo Coeficiente de Correlação de Pearson. A PCR padronizada apresentou uma sensibilidade analítica de 457 DICC50/mL. O seqüenciamento do produto de PCR revelou que a amostra vacinal é do tipo CPV-2. A RT-PCR padronizada apresentou uma sensibilidade analítica de 1030 cópias de DNA/mL e uma boa especificidade analítica, pois não detectou o DNA de Adenovírus canino tipos 1 e 2 e Herpesvírus Equino tipo 1. A RT-PCR exibiu Coeficientes de Variação de triplicatas intra-ensaio de 0,43% e inter-ensaio de 0,29%. O Coeficiente de Correlação de Pearson entre o título infeccioso das amostras virais e o número de cópias obtido na RT-PCR foi de 0,55, considerado moderadamente positivo. Considerando que a região alvo da RT-PCR padronizada apresentou 100% de identidade com 93,52% (159/170) das amostras pesquisadas no GenBank pelo BLAST, a RT-PCR padronizada sugere ter um potencial uso no diagnóstico
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 05.09.2011
  • Online source access
    How to cite
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    • ABNT

      SILVA, Alexandra Rosa da; RICHTZENHAIN, Leonardo José. Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real. 2011.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/ >.
    • APA

      Silva, A. R. da, & Richtzenhain, L. J. (2011). Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/
    • NLM

      Silva AR da, Richtzenhain LJ. Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real [Internet]. 2011 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/
    • Vancouver

      Silva AR da, Richtzenhain LJ. Análise da cinética de replicação do parvovírus canino em cultivo de células CRFK através da PCR em tempo real [Internet]. 2011 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-07082012-163057/

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