Estudo da carga parasitária e dos genótipos de Toxoplasma gondii na toxoplasmose congênita (2013)
- Authors:
- Autor USP: TARGA, LILIA SPALETA - IMT
- Unidade: IMT
- Subjects: TOXOPLASMOSE CONGÊNITA; TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO E PROCEDIMENTOS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; GENÓTIPOS
- Language: Português
- Abstract: O genótipo e a carga parasitária constituem dois dos principais fatores associados à patogênese na toxoplasmose congênita. Na Europa e nos EUA, o genótipo II é o mais prevalente em infecções congênitas, enquanto que na América do Sul existem evidências apontando para uma maior frequência de genótipos atípicos ou recombinantes, associados a casos mais graves. A carga parasitária também parece atuar como fator de risco independente associado ao prognóstico fetal. Os objetivos do estudo foram padronizar uma amplificação quantitativa (qrtPCR) com iniciadores do gene B1 para avaliar a carga parasitária; determinar o genótipo parasitário por multiplex-nested-PCR-RFLP dos marcadores 5’-SAG2, 3’-SAG2, SAG3 e GRA6, seguido de sequenciamento para confirmação da RFLP e análises de polimorfismos; e verificar se existiria associação entre a carga parasitária e os genótipos parasitários nas mesmas gestações. Foram analisadas 76 amostras de líquido amniótico de gestações com toxoplasmose e 31 amostras controle. A qrtPCR apresentou LOD de 10 parasitos/mL, detectou as 76 amostras de estudo e nenhum controle. As cargas parasitárias variaram de 222 a 808.328,0 parasitos/mL. Houve duas amostras com valores acima de 104 parasitos/mL, apesar de todas as gestantes serem tratadas. Na genotipagem, SAG3 amplificou 55 amostras (54 tipo III e 1 tipo II); 5’ e 3’ - SAG2 amplificaram 54 amostras (todas tipo I), e GRA6, amplificou 20 amostras (todas tipo III). A única amostra com genótipo parasitário SAG3 – tipo II foi a que apresentou mais polimorfismos (n=4), carga parasitária de 958 parasitos/mL, porém o recém-nascido foi assintomático. Neste estudo, SAG3 e 5’ e 3’-SAG2 foram mais eficientes que GRA6 na genotipagem (McNemar, p<0,001).Os sequenciamentos confirmaram 100% dos resultados de RFLP, e foram encontradas 27 amostras com e 49 sem polimorfismos, sem diferenças entre as cargas parasitárias dos dois grupos (Kruskal Wallis, p = XXX). Mais de um polimorfismo foi observado em cinco amostras. Foram detectados 37 polimorfismos: 26 heterozigoto/sinônimos e 11 homozigotos/sinônimos, não havendo regiões hot spot. Quanto à correlação clínico-laboratorial, dos 76 recém-nascidos, todos apresentaram IgM positiva ao nascimento, e 75 eram assintomáticos. O único recém-nascido sintomático apresentava tríade de Sabin e uma das duas cargas parasitárias mais elevadas do estudo (309.574 parasitos/mL), porém o genótipo não foi discriminante e não havia polimorfismos. A outra amostra com carga parasitária acima de 104 parasitos/mL pertencia a recém-nascido assintomático, com genótipo não discriminante, sem polimorfismos. O estudo concluiu que a técnica de Real Time foi padronizada com sucesso, usando os iniciadores B22 e B23 do gene B1, podendo ser empregada na rotina diagnóstica. Além disso, foi possível realizar a genotipagem das amostras com melhor desempenho de SAG3 e 5’ e 3’-SAG2. O sequenciamento confirmou a confiabilidade da técnica de RFLP, e encontrou frequência elevada de polimorfismos, todos sinônimos, sem regiões hot spot, e aparentemente sem associação com a carga parasitária. Houve elevada variabilidade das cargas parasitárias, porém grande homogeneidade dos genótipos parasitários, não tendo sido observada associação entre a carga parasitária e os genótipos de T. gondii no estudo.
- Imprenta:
- Data da defesa: 08.01.2013
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ABNT
TARGA, Lília Spaleta. Estudo da carga parasitária e dos genótipos de Toxoplasma gondii na toxoplasmose congênita. 2013. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2013. . Acesso em: 24 fev. 2026. -
APA
Targa, L. S. (2013). Estudo da carga parasitária e dos genótipos de Toxoplasma gondii na toxoplasmose congênita (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Targa LS. Estudo da carga parasitária e dos genótipos de Toxoplasma gondii na toxoplasmose congênita. 2013 ;[citado 2026 fev. 24 ] -
Vancouver
Targa LS. Estudo da carga parasitária e dos genótipos de Toxoplasma gondii na toxoplasmose congênita. 2013 ;[citado 2026 fev. 24 ]
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