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Determinação do perfil lipídico por espectrometria de massas de oócitos bovinos maturados em meio suplementados com fosfolipídio: uma nova estratégia para modular a criotolerância oocitária (2012)

  • Authors:
  • Autor USP: PITANGUI, CAROLINE PALMIERI - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RGO
  • Subjects: OÓCITOS; FERTILIZAÇÃO "IN VITRO" ANIMAL; FOSFOLIPÍDEOS; ESPECTROMETRIA DE MASSAS
  • Keywords: Maturação in vitro; Perfil lipídico; In vitro maturation; Lipid profile; Mass spectrometry; Oocyte; Phospholipid
  • Language: Português
  • Abstract: O interesse em criopreservar tecido ovariano, embriões e oócitos, principalmente quando se trata de pacientes oncológicas que irão ser submetidas a tratamentos potencialmente esterilizantes, vem crescendo nas últimas duas décadas. Uma das técnicas propostas para se preservar a fertilidade destas pacientes é o congelamento de oócitos, podendo estes ser obtidas já maturados in vivo após a hiperestimulação avariaria controlada ou na forma de oócitos imaturos na ausência de estimulação, nestes casos procede-se a maturação in vitro (MIV) de oócitos pré congelamento. No entanto sabe-se que a criopreservação causa danos de viabilidade e perda do potencial reprodutivo destes oócitos. Alguns autores têm demonstrado que esses danos podem ser reduzidos por meio de cultivas que modulam o perfil lipídico tanto de oócitos como embriões, fazendo com que estes sejam menos susceptíveis ao congelamento. Uma das técnicas que permite a verificação da composição lipídica de células e outras estruturas é a espectrometria de massas. Os objetivos deste estudo foram comparar o perfil lipídico de oócitos maturados in nitro na presença ou ausência de PL e correlacionar com o perfil lipídico e desenvolvimento embrionário dos embriões produzidos in vitro. Além disso, avaliamos o perfil lipídico dos meios de maturação usando oócitos bovinos como modelo experimental. CCOs foram maturados em meio TCM ou TCM + PL, contendo 10% de soro fetal bovino, 0,5 ‘mü’g/ml de FSH, 5 ng/ml de LH e 1 mg/mL de 17‘beta’-estradiol em atmosfera amida, com 5% de C02 durante 24 horas. Após a MIV, os oócitos foram desnudados mecanicamente, lavados em PBS e armazenados a -80 ° C, até a análise de perfil lipídico. Oócitos, meios de maturação e blastocistos foram submetidos à técnica de MALDIMS (ionização e dessorção a laser assistida por matriz /espectrometria de massas). Diferenças no perfil lipídico foramidentificadas por PCA (análise de componentes principais). O perfil lipídico dos meios de maturação determinado por MALDI-MS permitiu a diferenciação entre TCM e TCM + PL. No entanto, a análise dos oócitos maturados in vitro demonstrou que o perfil lipídico dos grupos controle ou suplementado com PL não foram diferentes. Da mesma forma, não foram observadas diferenças no perfil lipídico e na embriogênese dos embriões resultantes. No entanto, diferenças no perfil lipídico entre COC e oócitos desnudas (ODs) maturados in vitro foram detectadas. Oócitos maturados com as células do cumulus contêm tons PC com maiores graus de insaturação dos resíduos de ácidos graxas, enquanto ODs contêm espécies de PC com ácidos graxas insaturados (18:0) ou monoinsaturados (18:1). O MALDI-MS permite a obtenção de perfis lipídicos informativos para meios de cultura e oócitos maturados in nitro. A identificação de mudanças no metabolismo lipídico de oócitos durante a MIV pode contribuir para determinar a suplementação lipídica adequada dos meios de MIV e soluções de vitrificação, contribuindo para otimizar os protocolos de criopreservação de oócitos humanos
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 29.11.2012
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    • ABNT

      PITANGUI, Caroline Palmieri; SILVA, Ana Carolina Japur de Sá Rosa e. Determinação do perfil lipídico por espectrometria de massas de oócitos bovinos maturados em meio suplementados com fosfolipídio: uma nova estratégia para modular a criotolerância oocitária. 2012.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-27012017-141712/ >.
    • APA

      Pitangui, C. P., & Silva, A. C. J. de S. R. e. (2012). Determinação do perfil lipídico por espectrometria de massas de oócitos bovinos maturados em meio suplementados com fosfolipídio: uma nova estratégia para modular a criotolerância oocitária. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-27012017-141712/
    • NLM

      Pitangui CP, Silva ACJ de SR e. Determinação do perfil lipídico por espectrometria de massas de oócitos bovinos maturados em meio suplementados com fosfolipídio: uma nova estratégia para modular a criotolerância oocitária [Internet]. 2012 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-27012017-141712/
    • Vancouver

      Pitangui CP, Silva ACJ de SR e. Determinação do perfil lipídico por espectrometria de massas de oócitos bovinos maturados em meio suplementados com fosfolipídio: uma nova estratégia para modular a criotolerância oocitária [Internet]. 2012 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-27012017-141712/


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