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Desenvolvimento de um bioprocesso para expansão de células mesenquimais estromais multipotentes em microcarregadores (2012)

  • Authors:
  • USP affiliated author: CARUSO, SÂMIA RIGOTTO - FMRP
  • School: FMRP
  • Sigla do Departamento: RCM
  • Subjects: CULTURA DE CÉLULAS; CÉLULAS-TRONCO; NEOPLASIAS
  • Keywords: Células mesenquimais estromais multipotentes; frasco spinner; microcarregadores; mesenchymal stem cells; microcarriers; spinner flasks
  • Language: Português
  • Abstract: As células mesenquimais estromais multipotentes (CMM) são na atualidade uma fonte atrativa para aplicações na engenharia de tecidos e na terapia celular. Devido à baixa disponibilidade nos tecidos (0,01%-0,0005%) e às elevadas doses necessárias para uma infusão (aproximadamente ‘10 POT.6’ células/Kg paciente) tornou-se necessário o desenvolvimento de tecnologias de expansão in vitro, eficientes e de custo reduzido, que permitam a obtenção de CMM com manutenção das características funcionais (diferenciação e inibição da proliferação de linfócitos), imunofenotípicas e citogenéticas. As CMM são células aderentes, ou seja, necessitam de um substrato sólido para se aderir e proliferar. O procedimento convencional de expansão em garrafas estáticas, geralmente envolve um processo laborioso em que não há correto controle e monitoramento dos parâmetros de cultivo e possui uma maior susceptibilidade à contaminação devido à excessiva manipulação para atingir o número ideal de células. Além disso, este tipo de cultivo não permite uma produção em larga escala. Em função disso, o presente trabalho foi proposto com o objetivo de desenvolver um bioprocesso escalonável, economicamente viável e eficiente para expansão de CMM derivadas da medula óssea em microcarregadores. Para isso, as células foram cultivadas em microcarregador Cyotdex 3, em frasco spinner com o meio α-MEM suplementado com 15% de SFB. Foram avaliadas neste trabalho, a adesão celular aos microcarregadores, crescimento, metabolismo, recuperação celular final e avaliação das propriedades funcionais e imunofenotípicas pré e pós cultivo, comparando ao cultivo já estabelecido em garrafas estáticas. De maneira geral, os resultados obtidos mostraram que foi possível expandir CMM utilizando a tecnologia de microcarregadores. A análise do metabolismo celular mostrou que não houve exaustão de nutrientes importantes como glicosee glutamina durante o cultivo, tampouco formação dos subprodutos lactato e amônia em concentrações inibitórias. As células recuperadas após a expansão mantiveram as características imunofenotípicas e funcionais. A produção média (n=10) foi de aproximadamente 4,9x‘10 POT.5’ cel/mL. Como o sistema utilizado permite o escalonamento, se utilizássemos um biorreator de 1L, seria possível a produção de aproximadamente 5x‘10 POT.8’ células que seriam suficientes para tratar mais de 3 pacientes de até 70Kg na dose de 2x‘10 POT.6’ células/Kg. Para expansão da mesma quantidade de células na forma tradicional seriam necessárias 135 garrafas de 175 ‘cm POT.2’ com um custo total de expansão duas vezes superior à estimativa do custo de expansão utilizando microcarregadores
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 04.05.2012
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    • ABNT

      CARUSO, Sâmia Rigotto; SWIECH, Kamilla. Desenvolvimento de um bioprocesso para expansão de células mesenquimais estromais multipotentes em microcarregadores. 2012.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13062012-120101/ >.
    • APA

      Caruso, S. R., & Swiech, K. (2012). Desenvolvimento de um bioprocesso para expansão de células mesenquimais estromais multipotentes em microcarregadores. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13062012-120101/
    • NLM

      Caruso SR, Swiech K. Desenvolvimento de um bioprocesso para expansão de células mesenquimais estromais multipotentes em microcarregadores [Internet]. 2012 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13062012-120101/
    • Vancouver

      Caruso SR, Swiech K. Desenvolvimento de um bioprocesso para expansão de células mesenquimais estromais multipotentes em microcarregadores [Internet]. 2012 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13062012-120101/

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