Estudos estruturais do receptor ativado por ativadores de peroxissomos humano, hPPAR'delta' (2012)
- Authors:
- Autor USP: BATISTA, FERNANDA APARECIDA HELENO - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FFI
- Subjects: RECEPTORES; LIGANTES; PROTEÍNAS
- Keywords: Ligand; Nuclear Receptor; PPAR; PPAR; Receptor Nuclear
- Language: Português
- Abstract: Os PPARs são fatores de transcrição ativados por ligantes, pertencentes à superfamília dos receptores nucleares, que são considerados sensores de lipídeos capazes de transformar alterações nos padrões de lipídeos/ácidos graxos dos organismos em atividade metabólica. Com isto, os 3 isotipos ('alfa', 'delta' e 'gamma') estão associados a diferentes desordens metabólicas como doenças vasculares, diabetes, obesidade, câncer e certas doenças mentais que constituem um grave problema de saúde pública mundial, o que torna esta classe de proteínas, um valioso alvo para a indústria farmacêutica. Embora a importância do hPPAR'delta' na regulação da transcrição de genes relacionados a uma série de processos metabólicos seja conhecida, não há ainda nenhum fármaco no mercado cujo alvo seja este receptor. O maior conhecimento a respeito da estrutura deste receptor pode trazer esclarecimentos capazes de auxiliar o desenvolvimento racional de fármacos. Desta forma, no presente trabalho, buscou-se encontrar características estruturais importantes para a seletividade e especificidade dos ligantes pelo isotipo 'delta'. Para tal, determinou-se as condições de expressão e purificação da proteína hPPAR'delta' LBD,bem como as condições apropriadas de manutenção da mesma por meio da técnica de dicroísmo circular. O estado oligomérico deste receptor foi determinado em solução através das técnicas de cromatografia por exclusão de tamanho e por espalhamento dinâmico de luz, onde se concluiuque a proteína é monomérica nas condições testadas. Além disto, através de uma estrutura de alta resolução da proteína hPPAR'delta' LBD com o ligante GW 0742, propôs-se a construção de dois mutantes, V312M e I328M, através dos quais concluiu-se que estes dois resíduos são potencialmente importantes para interação de ligantes estruturalmente relacionados com GW 0742, ao isotipo 'delta', indicando dois determinantes relacionados à seletividade de ligantes por este isotipo. Como existem poucos relatos sobre a estrutura completa deste receptor, e consequentemente da influência que os domínios N-terminal e DBD apresentam sobre o domínio LBD, um breve estudo da interação diferencial entre o receptor nuclear hPPAR'delta' Full e três diferentes cofatores, em presença de ligante agonista e antagonista foi realizado. Para isto, determinou-se as condições de expressão e purificação da proteína hPPAR'delta' Full, e e prosseguiu-se com ensaios de anisotropia de fluorescência, através dos quais ficou claro que cada cofator apresenta um padrão diferente de interação com a proteína que pode ser dependente de outras regiões da proteína além daquelas já classicamente descritas. Isto é um forte indicativo de que diferentes regiões do hPPAR'delta' podem ser chave no processo de regulação por intermédio de cofatores
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2012
- Data da defesa: 02.03.2012
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ABNT
BATISTA, Fernanda Aparecida Heleno. Estudos estruturais do receptor ativado por ativadores de peroxissomos humano, hPPAR'delta'. 2012. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2012. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-01062012-175615/. Acesso em: 29 jul. 2024. -
APA
Batista, F. A. H. (2012). Estudos estruturais do receptor ativado por ativadores de peroxissomos humano, hPPAR'delta' (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-01062012-175615/ -
NLM
Batista FAH. Estudos estruturais do receptor ativado por ativadores de peroxissomos humano, hPPAR'delta' [Internet]. 2012 ;[citado 2024 jul. 29 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-01062012-175615/ -
Vancouver
Batista FAH. Estudos estruturais do receptor ativado por ativadores de peroxissomos humano, hPPAR'delta' [Internet]. 2012 ;[citado 2024 jul. 29 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-01062012-175615/
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