Avaliação do sistema de mobilização de poli-3-hidroxibutirato em Burkholderia sacchari (2011)
- Authors:
- Autor USP: GOMEZ, JOSÉ GREGORIO CABRERA - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Polihidroxialcanoatos (PHA) constituem uma família de poliésteres acumulados intracelularmente por bactérias [1]. Poli-3-hidroxibutirato (P3HB) é o mais conhecido dos PHA que tem despertado grande interesse industrial devido às suas propriedades termoplásticas. A mobilização de PHA tem sido objeto de poucos estudos [2]. Neste trabalho, foram obtidos mutantes de B. sacchari LFM101 utilizando o transposon mini-Tn5. Estes foram avaliados com relação à mobilização de P3HB e sobrevivência sob condições de cultivo para obtenção do polímero.Os mutantes e as linhagens controle foram cultivados em Agar Nutriente por 48 horas e inoculados em Caldo Nutriente por 24 horas (30ºC, 150rpm). Após este período, 10 mL do cultivo foram inoculados em meio mineral (200 mL) contendo sacarose (15g/L) e sulfato de amônio (1g/L) e incubados por mais 24 horas (30ºC, 150rpm). 200mL deste cultivo foram centrifugados e as células resuspensas e inoculadas A inserção do transposon foi realizada por conjugação da linhagem B. sacchari LFM 101 com E. coli, carregando o plasmídeo pUTKm2 contendo o transposon mini-Tn5. As células que se desenvolveram em meio mineral contendo glicose (1g/L) e canamicina (50mg/L) foram consideradas linhagens de B. sacchari que receberam o transposon. Os clones obtidos foram repicados em meio mineral contendo sacarose (5g/L) e sulfato de amônia (0,5g/L) e incubados por 6 dias para favorecer o acúmulo de P3HB e por mais 5 dias a 30°C após a adição de sulfato de amônio (100g/L) em poços perfurados no meio de cultura sólido, para a mobilização do P3HB acumulado.O acúmulo e mobilização do P3HB foram avaliados por inspeção visual da opacidade das colônias, utilizando com controles a linhagem selvagem (LFM 101) e seus mutantes deficientes no acúmulo (LFM 344) ou mobilização do P3HB (LFM 403). em meio mineral (200mL) sem fonte de carbono e contendo 3g/L de sulfato de amônio (30°C, 150rpm). Ao longo do cultivo avaliou-se massa seca celular, teor de P3HB e viabilidade celular.As linhagens 60-27 e 91-1, obtidas na primeira etapa do projeto, foram analisadas e comparadas com a linhagem LFM101 selvagem em diferentes aspectos. A linhagem 60-27 apresentou dados semelhantes aos da linhagem selvagem quanto às taxas de biomassa total e residual, apresentou uma pequena diferença, se significativa, em termos de mobilização de P3HB. Observa-se uma taxa mais lenta de mobilização, mas que também atinge 100% ao final do experimento. Chama atenção o fato de que a viabilidade celular apresentou baixa modificação, ou seja, sem o aumento apresentado pela linhagem selvagem. A linhagem 91-1 apresentou um pequeno aumento na mobilização de P3HB em relação à linhagem selvagem. O fato que chamou atenção foi que mesmo o teor de P3HB sendo similar, a biomassa total inicial é superior para o mutante 91-1, portanto, uma maior concentração de P3HB está acumulada. Sua viabilidade celular aumentou intensamente no inicio do cultivo de mobilização e logo após as primeiras horas caiu bastante e não mais oscilou significativamente até o final do experimento.Possivelmente, o mutante 91-1 está afetado em um dos diversos genes relacionados ao processo de mobilização de PHAs, mas que não deve ser o mais importante para a realização desse papel.
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2011
- Conference titles: científica da USP (SIICUSP)
-
ABNT
UESATO, Eric G. et al. Avaliação do sistema de mobilização de poli-3-hidroxibutirato em Burkholderia sacchari. 2011, Anais.. São Paulo: Universidade de São Paulo, 2011. . Acesso em: 20 jan. 2026. -
APA
Uesato, E. G., Lozano, G. C., Merchan-Castellanos, N. A., Silva, L. F. da, & Gomez, J. G. C. (2011). Avaliação do sistema de mobilização de poli-3-hidroxibutirato em Burkholderia sacchari. In . São Paulo: Universidade de São Paulo. -
NLM
Uesato EG, Lozano GC, Merchan-Castellanos NA, Silva LF da, Gomez JGC. Avaliação do sistema de mobilização de poli-3-hidroxibutirato em Burkholderia sacchari. 2011 ;[citado 2026 jan. 20 ] -
Vancouver
Uesato EG, Lozano GC, Merchan-Castellanos NA, Silva LF da, Gomez JGC. Avaliação do sistema de mobilização de poli-3-hidroxibutirato em Burkholderia sacchari. 2011 ;[citado 2026 jan. 20 ] - The creC regulator of Escherichia coli, a new target for metabolic manipulations
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