Caracterização molecular e fenotípica de amostras bacterianas pertencentes ao complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (2011)
- Authors:
- Autor USP: TAKAGI, ELIZABETH HARUMMYY - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBC
- Subjects: MICROBIOLOGIA MÉDICA; INFECÇÃO HOSPITALAR; BIOLOGIA MOLECULAR; BACTÉRIAS (RESISTÊNCIA)
- Language: Português
- Abstract: Nos últimos 30 anos, Acinetobacter tornou-se um dos patógenos de maior preocupação clínica pela falta de terapias eficazes em virtude do fenótipo de multirresistência frequentemente apresentado. Dentre as espécies do gênero Acinetobacter, A. baumannii, A. genoespécie 3 e A. genoespécie 13TU são as mais comumente encontradas a partir de amostras biológicas. Estas espécies ao lado de A. calcoaceticus constituem o complexo A. calcoaceticus-A. baumannii (ACB). Este estudo propõe um esquema composto de duas PCRs para a identificação das espécies de interesse médico que fazem parte do complexo ACB. O método é simples, rápido e, além de identificar as espécies, permite pesquisar a presença de genes de resistência. Foram identificadas 515 amostras do complexo ACB, isoladas de pacientes no período de janeiro de 2005 a dezembro de 2010. A identificação das espécies do complexo ACB foi realizada por esquema composto de duas reações de PCR. Foram avaliados os perfis de sensibilidade por disco difusão e a pesquisa da presença dos genes Bla´IND.OXA-23-like´, ´blaIND.OXA-24-like´, ´blaIND.OXA-51-like´, ´blaIND.OXA-58-like´, ´blaIND.IMP´, ´blaIND.VIM´, ´blaIND.SIM´, ´blaIND.SPM´ e ´blaIND.GIM´ foi realizada por PCR utilizando-se iniciadores específicos. No grupo de amostras estudas, 82,5% são A. baumannii (425), 11,5% A. genoespécie 13TU (59) e 6,0% A. genoespécie 3 (30), sendo A. baumannii mais isolado em pacientes internados em UTIs (p=0,0407) e A. genoespécie 13TU mais isolado em pacientes de outros ambientes hospitalares (p=0,0204). A. baumannii apresentou menor sensibilidade a todos os antimicrobianos quando comparado com A. genoespécie 13TU e A. genoespécie. 3 (p<0,05).Foi possível observar ao longo do período estudado o aumento significativo da resistência aos carbapenêmicos e da sensibilidade a gentamicina por A. baumannii entre os isolados de pacientes de UTIs (p<0.05). Nenhum dos genes codificadores para metalo-lactamases foi detectado nas amostras estudadas Dentre os cepas resistentes aos carbapenêmicos (176) o gene ´blaIND.OXA´-23 foi detectado em 81,25% e uma amostra de A. baumannii apresentou o gene codificador para OXA-72. A tipagem molecular foi realizada por RAPD e para os isolados resistentes aos carbapenêmicos também por PFGE. Resultados obtidos por RAPD revelaram menor diversidade entre os isolados de pacientes internados em UTIs. O dendrograma obtido utilizando-se PFGE separou dois clones cujos componentes eram resistentes aos carbapenêmicos, no entanto não apresentavam o gene ´blaIND.OXA-23-like´. A produção de acil-homoserina lactona, autoindutor-2 e autoindutor-3 de três amostras de cada espécie clínica do complexo ACB foi pesquisada utilizando-se bioensaios. Apenas Autoindutor 3 foi detectado por bioensaio e em menor quantidade no meio précondicionados obtido a partir de A. genoespécie 3 quando comparado com A. genoespécie 13TU e A. baumannii (p<0.05). Três cepas de cada espécie clínica do complexo ACB foi avaliada quanto a capacidade de adesão em monocamada de células Hep-2, MRC-5 e NCI-H292, sendo essa última a que revelou diferenças entre as espécies clínicas do complexo ACB. A. baumannii apresentou adesão difusa, A. genoespécie 13 TU adesão com formação de agrupamentos e A. genoespécie 3 não aderiu. Esse mesmo ensaio foi realizado na presença de propanolol e notou-se a diminuição de células aderidas por campo observado. Dez cepas de cada espécie clínica do complexo ACB foram pesquisadas quanto a produção de biofilme por ensaio colorimétricoutilizando cristal violeta e foi possível notar a produção significativa de biofilme por A. baumannii, quando comparado com A. genoespécie 3 (p<0.05). Esse mesmo ensaio na presença de de fentolamina, mostrou a diminuição significativa na produção do biofilme por A. baumannii. A interferência no ensaio de adesão bacteriana e biofilme, na presença de fentolamina ou propanolol, sugerem o envolvimento do autoindutor-3 na regulação desses mecanismos de virulência
- Imprenta:
- Data da defesa: 31.08.2011
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ABNT
TAKAGI, Elizabeth Harummyy. Caracterização molecular e fenotípica de amostras bacterianas pertencentes ao complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii. 2011. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22122011-085102/. Acesso em: 23 fev. 2026. -
APA
Takagi, E. H. (2011). Caracterização molecular e fenotípica de amostras bacterianas pertencentes ao complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22122011-085102/ -
NLM
Takagi EH. Caracterização molecular e fenotípica de amostras bacterianas pertencentes ao complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii [Internet]. 2011 ;[citado 2026 fev. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22122011-085102/ -
Vancouver
Takagi EH. Caracterização molecular e fenotípica de amostras bacterianas pertencentes ao complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii [Internet]. 2011 ;[citado 2026 fev. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22122011-085102/
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