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Hidroperóxidos de lipídios como fontes de oxigênio molecular singlete (´OIND.2´ [´ANTIPOT.1´´ΔIND.g´]), detecção e danos em biomoléculas (2011)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: ÂNGELI, JOSé PEDRO FRIEDMANN - IQ
  • Unidades: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Subjects: BIOQUÍMICA; RADICAIS LIVRES; DANO AO DNA
  • Language: Português
  • Abstract: O estudo do processo da peroxidação de lipídios tem aumentado nos últimos anos, principalmente devido à implicação dos hidroperóxidos de lipídios (LOOH) em diversos processos patológicos. A decomposição destes LOOH é capaz de gerar subprodutos capazes de promover danos em biomoléculas, incluindo proteínas e DNA. No presente trabalho, utilizando hidroperóxidos de ácido linoléico isotopicamente marcado com átomo de oxigênio-18 (´LAPOT.18 ´OPOT.18´OH), fomos capazes de demonstrar que estas moléculas gerararam oxigênio singlete marcado [´ANTIPOT.18´´(ANTIPOT.1´O´IND.2´)] em células em cultura. A detecção de tal espécie foi possível através da utilização de uma nova metodologia utilizando um derivado antracenico. Para este propósito foi utilizado o derivado de antraceno 3,3'-(9,10-antracenodiil) bisacrilato (DADB), cujo produto especifico da reação com o ´ANTIPOT.1´O´IND.2´ (o endoperóxido do DADB DADB´OIND.2´) do pode ser facilmente detectado por HPLC-MS/MS. De forma a expandir a compreensão dos efeitos tóxicos desses LOOH, investigamos o efeito destes compostos gerados intracelularmente. Para tal, foi utilizado o Rosa bengala (RB), um fotosensibilizador que tem afinidade por espaços apolares como membranas e lisossomos. A fotosenssibilização deste composto foi capaz de induzir a morte celular, e esta morte estaria relacionada a uma maior formação de ´ANTIPOT.1´O´IND.2´ e a um maior acumulo de peróxidos. Nestes estudos foi possível demonstrar que carotenóides e sistemas antioxidantes dependentes de glutationa foram capazes de proteger contra osefeitos tóxicos da fotosensibilização na presença de RB. Adicionalmente foram avaliados os efeitos da hemoglobina (Hb) e do hidroperóxido do ácido linoléico (LAOOH) em uma série de parâmetros toxicológicos, como citotoxicidade, estado redox, a peroxidação lipídica e dano ao DNA. Nós demonstramos que a pré-incubação das células com Hb e sua posterior exposição à LAOOH (Hb + LAOOH) levou a um aumento na morte celular, a oxidação do DCFH, formação de malonaldeído e fragmentação do DNA e que esses efeitos estavam relacionados com o grupo peróxido e ao heme presentes na Hb. Foi demonstrado que as células incubadas com LAOOH e Hb apresentaram um nível maior das lesões de DNA; 8-oxo-7,8-diidro-2 'desoxiguanosina e 1,´NPOT.2´-etheno-2'-desoxiguanosina. Além disso, as incubações com Hb levaram a um aumento nos níveis de ferro intracelular, e este alto nível de ferro correlacionada com a oxidação do DNA, avaliadas através da medida de sitios EndoIII e Fpg sensíveis. Nossos resultados comprovam que os LAOOHs apresentaram efeito citotóxico e genotóxico, mesmo em concentrações muito baixas, podendo contribuir para o desencadeamento de processos patologicos como o câncer e doenças cardiovasculares e neurodegenerativas
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 21.07.2011

  • How to cite
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    • ABNT

      ÂNGELI, José Pedro Friedmann; MASCIO, Paolo Di. Hidroperóxidos de lipídios como fontes de oxigênio molecular singlete (´OIND.2´ [´ANTIPOT.1´´ΔIND.g´]), detecção e danos em biomoléculas. 2011.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-13102011-084146/ >.
    • APA

      Ângeli, J. P. F., & Mascio, P. D. (2011). Hidroperóxidos de lipídios como fontes de oxigênio molecular singlete (´OIND.2´ [´ANTIPOT.1´´ΔIND.g´]), detecção e danos em biomoléculas. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-13102011-084146/
    • NLM

      Ângeli JPF, Mascio PD. Hidroperóxidos de lipídios como fontes de oxigênio molecular singlete (´OIND.2´ [´ANTIPOT.1´´ΔIND.g´]), detecção e danos em biomoléculas [Internet]. 2011 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-13102011-084146/
    • Vancouver

      Ângeli JPF, Mascio PD. Hidroperóxidos de lipídios como fontes de oxigênio molecular singlete (´OIND.2´ [´ANTIPOT.1´´ΔIND.g´]), detecção e danos em biomoléculas [Internet]. 2011 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-13102011-084146/

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