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Uma nova proteína RNA-ligante de 65kDa no terminal pré-sináptico de lula (Loligo) (2011)

  • Authors:
  • Autor USP: LICO, DIEGO TORRECILLAS PAULA - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBP
  • Subjects: LULA; MIOSINA; PROTEÍNAS QUINASES; BIOLOGIA CELULAR
  • Language: Português
  • Abstract: Identificou-se uma nova proteína RNA-ligante de 65 kDa (p65) nos terminais pré-sinápticos em frações de sinaptossomas de lóbulos ópticos e nos gânglios estrelados de lulas Loligo piei (espécie do Atlântico Sul). Esta proteína foi, inicialmente, detectada em western blots por sua reação cruzada com um anticorpo policlonal (C4), gerado contra o domínio cabeça da miosina Va de galinha. Várias sequências peptídicas foram obtidas por espectrometria de massas do p65 purificado. Anticorpos policlonais, produzidos em coelhos e gerados contra peptídeos sintéticos, marcaram o p65 em western blots, confirmando que o anticorpo original (C4) e o novo marcaram a mesma proteína. As análises dos dados de espectrometria de massas, em conjunto com informações contidas em uma biblioteca de ESTs (expressed sequence tag) de Loligo pealei (espécie do Atlântico Norte), revelaram um contig (contig 976). O contig apresenta uma fase aberta de leitura (ORF) composta de 359 aminoácidos contendo quatro sequências de peptídeos obtidas por espectrometria de massas, cujo alinhamento com o contig demonstrou 94% de identidade e 100% de homologia. O contig codifica uma proteína de 37 kDa, sugerindo cerca de 57% de p65. Análises da ORF do contig 976 no GenBank do NCBI pelo blastp (proteína-proteína) revelaram que esse contig pertence a uma grande família de proteínas RNA-ligantes, conhecidas como heterogeneous nuclear ribonucleoproteins (hnRNP) subtipo A/B. Estudos bioquímicas mostraram que p65 se associa a pequenas partículas em fração pós-mitocondrial, cuja sedimentação é sensível ao tratamento com RNase. Esse resultado sugere que p65 está associado a partículas de mRNA-RNPs. Estudos de imuno-histoquímica e imunofluorescência demonstraram uma colocalização parcial de p65 com sinaptotagmina dentro da camada plexiforme externa dos lóbulos ópticos e zonas présinápticas do gânglio estrelado. Alémdisso, foram observadas marcações pontuais nos sinaptossomas isolados dos lóbulos ópticos de lula. Os dados indicam que p65 é uma nova proteína RNA-ligante, localizada nos terminais pré-sinápticos dos neurônios de lula e pode ter um papel na localização, tradução e processamento de RNAs em regiões sinápticas
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 02.06.2011

  • How to cite
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    • ABNT

      LICO, Diego Torrecillas Paula; LARSON, Roy Edward. Uma nova proteína RNA-ligante de 65kDa no terminal pré-sináptico de lula (Loligo). 2011.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2011.
    • APA

      Lico, D. T. P., & Larson, R. E. (2011). Uma nova proteína RNA-ligante de 65kDa no terminal pré-sináptico de lula (Loligo). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Lico DTP, Larson RE. Uma nova proteína RNA-ligante de 65kDa no terminal pré-sináptico de lula (Loligo). 2011 ;
    • Vancouver

      Lico DTP, Larson RE. Uma nova proteína RNA-ligante de 65kDa no terminal pré-sináptico de lula (Loligo). 2011 ;


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