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Caracterização funcional dos ligantes da E3 ubiquitina ligase ‘SCF POT. FBXO25’ (2011)

  • Authors:
  • Autor USP: TEIXEIRA, FELIPE ROBERTI - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBI
  • Subjects: PROTEÍNAS (INTERAÇÃO;IDENTIFICAÇÃO); BIOQUÍMICA
  • Language: Português
  • Abstract: A proteína FBXO25 é uma das 80 proteínas do tipo F-box (FBP) que atuam como fatores de especificidade para a família mais estudada de E3 ubiquitina-ligases humanas, as do tipo RING (Really Interesting New Gene-BoX 1) oligoméricas denominadas SCF1- compostas por Skp1, Cullin1, RBX1 e uma FBP - que estão envolvidas na ubiquitinação de proteínas para degradação via Sistema Ubiquitina Proteassoma (SUP). Menos de 10% das FBPs tem sua função e substratos identificados. A FBXO25 é capaz de formar um complexo SCF1 ativo e acumula-se no núcleo celular formando uma nova estrutura subnuclear denominada FANDs (FBX025 Associated Nuclear Domains) que estão envolvidos na ubiquitinação nuclear. No entanto, embora tenhamos avançado nos estudos de localização intracelular de FBXO25, ainda não se conhecem os parceiros moleculares dessa proteína, impossibilitando assim a determinação de sua função intracelular. Sendo assim, nesse trabalho desenvolvemos uma nova estratégia de purificação sequencial por afinidade denominada GF-TAP (GST/FLAG-Tandem Affinity Purification) combinada a espectrometria de massas para identificação e caracterização funcional dos ligantes de FBXO25. Fomos capazes de identificar 131 potenciais ligantes, dentre eles, co-purificamos o complexo ‘SCF1 POT.FBXO25’ ativo e validamos a interação com as proteínas ribossomais RPS7 e RPL7 e detalhamos a funcionalidade da interação entre FBXO25 e a proteína 'beta'-activa. A inibição da polimerização de 'beta'-activa promoveu a desorganização dos FANDs, indicando seu papel na regulação da dinâmica desses corpos. Além disso, anticorpos anti-FBXO25 interferiram na transcrição via RNA polimerase 11 em ensaios de transcrição in vitro. Desta forma, esse trabalho abriu novas perspectivas para o entendimento desse novo compartimento e sua função no núcleo celular
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 02.03.2011

  • How to cite
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    • ABNT

      TEIXEIRA, Felipe Roberti; GOMES, Marcelo Damário. Caracterização funcional dos ligantes da E3 ubiquitina ligase ‘SCF POT. FBXO25’. 2011.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2011.
    • APA

      Teixeira, F. R., & Gomes, M. D. (2011). Caracterização funcional dos ligantes da E3 ubiquitina ligase ‘SCF POT. FBXO25’. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Teixeira FR, Gomes MD. Caracterização funcional dos ligantes da E3 ubiquitina ligase ‘SCF POT. FBXO25’. 2011 ;
    • Vancouver

      Teixeira FR, Gomes MD. Caracterização funcional dos ligantes da E3 ubiquitina ligase ‘SCF POT. FBXO25’. 2011 ;

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