Identificação e caracterização parcial de fração ligante de quitina da preparação paracoccina de Paracoccidioides brasiliensis (2010)
- Authors:
- Autor USP: MALLER, ANA CLÁUDIA PAIVA ALEGRE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- DOI: 10.11606/D.17.2010.tde-09092024-142711
- Subjects: PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS; IMUNOLOGIA; MICROBIOLOGIA
- Keywords: Paracoccidioides brasiliensis; Afinidade a quitina; Preparação paracoccina
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: Paracoccidioides brasiliensis é o agente causador da micose granulomatosa crônica mais prevalente na América do Sul, com alta incidência no Brasil. O fracionamento do extrato bruto de P. brasiliensis, chamado de preparação paracoccina, foi isolado por afinidades a N-acetilglicosamina e quitina. A preparação paracoccina possui componente(s) que contribui(em) para a adesão do fungo a matriz extracelular, e induz macrófagos a produzirem TNF-α e altas concentrações de NO. A partir da tecnologia IgY, descrita neste trabalho, tornou-se possível a produção de grandes quantidades de anticorpos policlonais contra a preparação paracoccina (PCN-prep), que viabilizaram os ensaios de rastreamento da biblioteca de cDNA de leveduras de P. brasiliensis. Alguns genes identificados continham sequência de tradução de proteínas já descritas para o isolado Pb18, como o gene PADG_02130.1, correspondente a uma ciclohidrolase. Um dado importante foi a aplicação de técnicas de proteômica para identificar componentes da preparação paracoccina, que destacou o gene que codifica uma proteína hipotética de P. brasiliensis, anotado como PADG_03347. A proteína resultante desse gene apresenta sequência polipeptídica com alta homologia a proteínas compostas por domínios plurais distintos, sendo um ligante de quitina e outro com atividade quitinolítica. O maior éxon do gene PADG_03347 foi clonado em sistema bacteriano para a expressão de molécula recombinante, que corresponde a mais de 80% da sequência polipeptídica predita para a molécula nativa. O fragmento recombinante foi reconhecido pelos anticorpos IgY anti-PCN-prep, reforçando a idéia de que a proteína expressa por PADG_03347 deve estar presente na PCN-prep. Adicionalmente, anticorpos presentes no soro de pacientes com paracoccidioidomicose, que reagiram fortemente com diversas frações em PCN-prep, reagiram também com afração recombinante. Esse fragmento recombinante foi caracterizado por possuir certa atividade de N-acetil-β-D-glicosaminidase, menor quando na comparação com o material purificado em coluna de quitina. Por outro lado, a atividade lectínica parece preservada na molécula recombinante, e essa atividade pode estar relacionada com a capacidade de induzir as produções de NO e TNF-alfa por macrófagos peritoneais, confirmadas nesse trabalho. Assim, os estudos de caracterização da molécula recombinante trouxeram informações importantes que devem guiar estudos futuros mais abrangentes com essa molécula
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2010
- Data da defesa: 23.04.2010
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- Este artigo é de acesso aberto
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- Cor do Acesso Aberto: gold
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ABNT
ALEGRE, Ana Claudia Paiva. Identificação e caracterização parcial de fração ligante de quitina da preparação paracoccina de Paracoccidioides brasiliensis. 2010. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-09092024-142711/. Acesso em: 09 out. 2024. -
APA
Alegre, A. C. P. (2010). Identificação e caracterização parcial de fração ligante de quitina da preparação paracoccina de Paracoccidioides brasiliensis (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-09092024-142711/ -
NLM
Alegre ACP. Identificação e caracterização parcial de fração ligante de quitina da preparação paracoccina de Paracoccidioides brasiliensis [Internet]. 2010 ;[citado 2024 out. 09 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-09092024-142711/ -
Vancouver
Alegre ACP. Identificação e caracterização parcial de fração ligante de quitina da preparação paracoccina de Paracoccidioides brasiliensis [Internet]. 2010 ;[citado 2024 out. 09 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-09092024-142711/ - Paracoccina recombinante reproduz as propriedades biológicas da lectina nativa e induz imunidade protetora contra a infecção por Paracoccidioides brasiliensis
- Receptor heterodimerization and co-receptor engagement in TLR2 activation induced by MIC1 and MIC4 from Toxoplasma gondii
- Toxoplasma gondii Chitinase induces macrophage activation
Informações sobre o DOI: 10.11606/D.17.2010.tde-09092024-142711 (Fonte: oaDOI API)
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