Fragmentos de anticorpos humanos (scFv) capazes de inibir, in vitro e in vivo, ações tóxicas do veneno de abelhas africanizadas (2010)
- Authors:
- Autor USP: FUNAYAMA, JAQUELINE CARLOS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: ABELHAS; AGENTE TÓXICO; IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: As abelhas africanizadas trouxeram inúmeras vantagens aos apicultores, mas essas possuem comportamentos indesejáveis tais como instinto de defesa da colônia e ataques em massa, resultando em acidentes graves, podendo levar a morte. O veneno de abelha é uma mistura complexa com atividades tóxicas e um tratamento efetivo para casos de intoxicação ainda é esperado. Uma alternativa para a produção do antiveneno é a tecnologia de Phage Display, que permite a produção de anticorpos humanos, sem causar a "Doença do soro" ou anafilaxia nos pacientes tratados. O objetivo deste trabalho foi produzir fragmentos de anticorpos monoclonais humanos (scFv), capazes de inibir ações tóxicas do veneno bruto de abelhas africanizadas. Utilizou-se um protocolo de imobilização das proteínas do veneno bruto em fase sólida, para seleção de fagos-anticorpos contra as mesmas. Duas seleções, de 4 e 3 turnos, para o veneno bruto e uma re-seleção para melitina foram realizados. Os fagos-anticorpos policlonais foram analisados por ensaio de ELISA e os melhores fumos foram escolhidos para a produção de placas de cultura de fagos anticorpos monoclonais. Os seis melhores clones foram selecionados por ensaio de ELISA e esses foram utilizados para a produção de fragmentos de anticorpos solúveis. Condições de produção e purificação foram estabelecidas e os clones foram testados quanto a sua capacidade de inibição do veneno. Após ensaio hemolítico de ponto final, 3 clones foram selecionados e testados emensaio de ELISA para detecção da ligação à melitina e fosfolipase \2018A IND.2\2019. Dois clones (C5 e C12) foram positivos para melitina e o clone A7 foi positivo para fosfolipase \2018A IND.2\2019. Os 3 clones foram testados em ensaio cinética de inibição de hemólise individualmente ou sinergicamente. Uma combinação sinérgica dos clones A7 e C12 foi a que apresentou melhores resultados e foi a ) escolhida para os ensaios de inibição de miotoxicidade e letalidade. A combinação de anticorpos conseguiu inibir a ação miotóxica do veneno in vivo e aumentou a sobrevida dos animais que receberam o tratamento
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2010
- Data da defesa: 22.02.2010
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ABNT
FUNAYAMA, Jaqueline Carlos. Fragmentos de anticorpos humanos (scFv) capazes de inibir, in vitro e in vivo, ações tóxicas do veneno de abelhas africanizadas. 2010. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2010. . Acesso em: 01 out. 2024. -
APA
Funayama, J. C. (2010). Fragmentos de anticorpos humanos (scFv) capazes de inibir, in vitro e in vivo, ações tóxicas do veneno de abelhas africanizadas (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Funayama JC. Fragmentos de anticorpos humanos (scFv) capazes de inibir, in vitro e in vivo, ações tóxicas do veneno de abelhas africanizadas. 2010 ;[citado 2024 out. 01 ] -
Vancouver
Funayama JC. Fragmentos de anticorpos humanos (scFv) capazes de inibir, in vitro e in vivo, ações tóxicas do veneno de abelhas africanizadas. 2010 ;[citado 2024 out. 01 ]
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