Identificação e caracterização de novos moduladores de divisão em Bacillus subtilis (2009)
- Authors:
- Autor USP: TAVARES, JOSÉ ROBERTO - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: BIOQUÍMICA; DIVISÃO CELULAR (ANÁLISE)
- Language: Português
- Abstract: Em procariotos, a principal forma de reprodução é a divisão binária, que permite à célula-mãe dar origem a duas outras células-filhas, com conteúdo genético idêntico ao da progenitora. Em Bacillus subtilis este processo acontece graças ao divisomo, um complexo formado por aproximadamente dezesseis proteínas, que leva à constrição da membrana e da parede, formando o septo de divisão. A montagem do divisomo é coordenada por FtsZ, um homólogo de tubulina, que polimeriza na região central da bactéria e serve de arcabouço para a montagem do divisomo. Partindo de um levantamento detalhado da distribuição dos genes envolvidos em divisão em genomas completos de procariotos detectamos que divIV A, um gene de divisão já bem caracterizado, apresentava um gene parálogo em B. subtilis, conhecido como ypsB. Para determinarmos se YpsB seria um novo componente do divisomo foi realizada uma caracterização citológica e funcional desta proteína. Utilizamos microscopia de fluorescência e fusões de YpsB a GFP para determinar a localização subcelular de YpsB. Estes experimentos revelaram que YpsB está presente no divisomo, apresentando um padrão de localização semelhante mas não idêntico ao de DivIV A. Medindo-se a taxa de co-localização entre o anel Z e YpsB ficou demonstrado que estas proteínas co-localizam em aproximadamente ´50 POR CENTO´, sugerindo que YpsB é recrutada depois que o anel Z é montado. Para determinar quando YpsB chega ao divisomo, usamos mutantes termo-sensíveisdas proteínas de divisão que revelaram a dependência de YpsB pelo sub complexo DivIB-DivIC-FtsL-FtsW-PBP2B. Já na ausência de DivIV A, YpsB continua associado ao divisomo, indicando que não depende do seu parálogo para localizar. Além disso, análises de deleções de YpsB mostraram que a porção: N-terminal da proteína é a mais importante para o seu recrutamento ao divisom Para determinarmos o papel de YpsB durante a divisão foi construído um ) mutante com deleção completa do gene. DivIVA é uma proteína responsável por localizar o sistema Min nos pólos da bactéria e assim contribui para a precisão espacial da divisão. Apesar de serem parálogos, a função I YpsB, no entanto, parece ser diferente da de DivIV A. Análise do mutante ypsB- mostrou que na sua ausência, o divisomo é montado e o seu posicionamento tanto em fase vegetativa como em esporulação não são afetados. Como ausência de YpsB não afeta perceptivelmente a divisão, combinamos a mutação em ypsB com mutações em outros genes envolvidos em divisão. A análise destes duplos mutantes revelou que a ausência simultânea de YpsB e Fts produz exacerbada lise celular e letalidade. Com base neste fenótipo e: evidências evolutivas, sugerimos que YpsB esteja envolvida na regulação (síntese de peptideoglicano do septo. Mais especificamente, YpsB ser responsável por modular a atividade de PBPl, uma enzima necessária para síntese de peptideoglicano septal
- Imprenta:
- Data da defesa: 31.07.2009
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ABNT
TAVARES, José Roberto. Identificação e caracterização de novos moduladores de divisão em Bacillus subtilis. 2009. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2009. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-26082009-141509/. Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Tavares, J. R. (2009). Identificação e caracterização de novos moduladores de divisão em Bacillus subtilis (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-26082009-141509/ -
NLM
Tavares JR. Identificação e caracterização de novos moduladores de divisão em Bacillus subtilis [Internet]. 2009 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-26082009-141509/ -
Vancouver
Tavares JR. Identificação e caracterização de novos moduladores de divisão em Bacillus subtilis [Internet]. 2009 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-26082009-141509/
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