Construção e transfecção de vetores plasmidiais contendo o gene da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) em células de Drosophila melanogaster (2009)
- Authors:
- Autor USP: LEMOS, MARCOS ALEXANDRE NOBRE - BIOTECNOL
- Unidade: BIOTECNOL
- Subjects: PROTEÍNAS RECOMBINANTES; DROSOPHILA; GLICOPROTEÍNAS; VÍRUS; RAIVA; EXPRESSÃO GÊNICA; BIOTECNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: O cDNA da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) foi clonado em vetores plasmidiais (indutíveis) contendo ou não o cDNA do sinal de secreção BiP e da resistência ao antibiótico higromicina B. Esses vetores foram transfectados em células S2 e foram obtidas populações e subpopulações. A população S2MTGPV-H apresentou níveis 5x maiores na expressão da GPV em análise por FACS (~ 50% das células) e por ELISA (~ 0,65 µg/107 células). A seleção de subpopulações permitiu um aumento de aproximadamente 10x na expressão da GPV, especialmente na população S2MTGPV*-H. O tratamento com NaBu resultou em uma redução de aproximadamente 20% no crescimento celular e um aumento de 50% na GPV expressa pela população S2MTGPV*-H (~ 8,3 µg/107 células). O meio de cultura SF900 II permitiu um maior crescimento das células S2MTGPV*-H e uma maior síntese de GPV comparado com outros meios de cultura. Nossos dados mostram que a expressão da GPV pôde ser otimizada através da construção de vetores de expressão/seleção, subpopulações, da exposição da cromatina e do meio de cultura utilizado
- Imprenta:
- Data da defesa: 23.09.2009
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ABNT
LEMOS, Marcos Alexandre Nobre. Construção e transfecção de vetores plasmidiais contendo o gene da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) em células de Drosophila melanogaster. 2009. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2009. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-29042010-091724/. Acesso em: 20 out. 2024. -
APA
Lemos, M. A. N. (2009). Construção e transfecção de vetores plasmidiais contendo o gene da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) em células de Drosophila melanogaster (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-29042010-091724/ -
NLM
Lemos MAN. Construção e transfecção de vetores plasmidiais contendo o gene da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) em células de Drosophila melanogaster [Internet]. 2009 ;[citado 2024 out. 20 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-29042010-091724/ -
Vancouver
Lemos MAN. Construção e transfecção de vetores plasmidiais contendo o gene da glicoproteína do vírus da raiva (GPV) em células de Drosophila melanogaster [Internet]. 2009 ;[citado 2024 out. 20 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-29042010-091724/
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