Evaluation of DNA extraction protocols for Brucella abortus PCR detection in aborted fetuses or calves born from cows experimentally infected with strain 2308 (2009)
- Authors:
- USP affiliated authors: FERREIRA, FERNANDO - FMVZ ; DIAS, RICARDO AUGUSTO - FMVZ ; FERREIRA NETO, JOSÉ SOARES - FMVZ
- Unidade: FMVZ
- DOI: 10.1590/s1517-83822009000300010
- Subjects: ABORTO ANIMAL; BOVINOS; BRUCELOSE ANIMAL; PROTOCOLOS CLÍNICOS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE
- Language: Inglês
- Abstract: O objetivo do presente estudo foi aperfeiçoar a detecção de Brucella abortus pela PCR em homogeneizados de órgãos de fetos abortados por vacas infectadas, importante mecanismo para descobrir focos da doença na fase de erradicação. Assim, foram comparados diferentes protocolos de extração de DNA, visando à detecção de B. abortus pela PCR em amostras clínicas colhidas de abortos ou de bezerros oriundos de vacas desafiadas com a estirpe 2308 de B. abortus. Para tanto, foram construídos dois grupos padrão ouro com base na bacteriologia clássica, constituídos por: 32 pulmões (17 positivos), 26 baços (11 positivos), 23 fígados (8 positivos) e 22 linfonodos bronquiais (7 positivos). Todas essas amostras foram submetidas a três protocolos de extração de DNA, seguidos do mesmo processo de amplificação com os primers B4 e B5. Nos resultados acumulados por órgão, a proporção de positivos nos pulmões foi maior que a encontrada nos fígados (p=0,04) e nos linfonodos bronquiais (p=0,004), e igual a verificada nos baços (p=0,18). Nos resultados acumulados por método de extração de DNA, a proporção de positivos para o protocolo de Boom foi maior que a verificada para o PK (p<0,0001) e GT (p=0,0004). Não houve diferença entre os protocolos PK e GT (p=0,5). Algumas amostras positivas ao isolamento foram negativas à PCR e vice-versa. Assim, a melhor estratégia para se pesquisar B. abortus em tecidos de fetos abortados ou de bezerros nascidos de vacas infectadas é a utilização, emparalelo, do isolamento e da PCR, com extração do DNA pelo método do Boom
- Imprenta:
- Source:
- Título: Brazilian Journal of Microbiology
- ISSN: 1517-8382
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 40, n. 3, p. 480-489, 2009
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc
-
ABNT
MATRONE, Marianna et al. Evaluation of DNA extraction protocols for Brucella abortus PCR detection in aborted fetuses or calves born from cows experimentally infected with strain 2308. Brazilian Journal of Microbiology, v. 40, n. 3, p. 480-489, 2009Tradução . . Disponível em: https://doi.org/10.1590/s1517-83822009000300010. Acesso em: 26 abr. 2025. -
APA
Matrone, M., Keid, L. B., Rocha, V. C. M., Vejarano, M. P., Ikuta, C. Y., Rosales Rodriguez, C. A., et al. (2009). Evaluation of DNA extraction protocols for Brucella abortus PCR detection in aborted fetuses or calves born from cows experimentally infected with strain 2308. Brazilian Journal of Microbiology, 40( 3), 480-489. doi:10.1590/s1517-83822009000300010 -
NLM
Matrone M, Keid LB, Rocha VCM, Vejarano MP, Ikuta CY, Rosales Rodriguez CA, Ferreira F, Dias RA, Ferreira Neto JS. Evaluation of DNA extraction protocols for Brucella abortus PCR detection in aborted fetuses or calves born from cows experimentally infected with strain 2308 [Internet]. Brazilian Journal of Microbiology. 2009 ; 40( 3): 480-489.[citado 2025 abr. 26 ] Available from: https://doi.org/10.1590/s1517-83822009000300010 -
Vancouver
Matrone M, Keid LB, Rocha VCM, Vejarano MP, Ikuta CY, Rosales Rodriguez CA, Ferreira F, Dias RA, Ferreira Neto JS. Evaluation of DNA extraction protocols for Brucella abortus PCR detection in aborted fetuses or calves born from cows experimentally infected with strain 2308 [Internet]. Brazilian Journal of Microbiology. 2009 ; 40( 3): 480-489.[citado 2025 abr. 26 ] Available from: https://doi.org/10.1590/s1517-83822009000300010 - Prevalência da tuberculose bovina no Arquipélago de Fernando de Noronha e sua importância para o direcionamento das ações de Defesa Sanitária Animal
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Informações sobre o DOI: 10.1590/s1517-83822009000300010 (Fonte: oaDOI API)
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