Caracterização funcional e estrutural de uma fosfolipase 'A IND. 2' ácida tóxica isolada da peçonha de Bothrops moojeni (2009)
- Authors:
- Autor USP: SANTOS FILHO, NORIVAL ALVES - FCFRP
- Unidade: FCFRP
- Sigla do Departamento: 604
- Subjects: FOSFOLIPASES (CARACTERÍSTICAS); SERPENTES; BIOQUÍMICA; VENENOS DE ORIGEM ANIMAL
- Language: Português
- Abstract: As fosfolipases 'A IND. 2' ('PLA. IND.2s', E.C. 3.1.1.4) pertencem a uma superfamília de enzimas que realizam a clivagem de fosfolipídios da membrana celular em ácidos graxos e lisofosfolipídios, numa reação dependente de cálcio. As 'PLA. IND. 2s' apresentam um importante papel em várias funções celulares, incluindo manutenção dos fosfolipídios celulares, geração de prostaglandinas e leucotrienos, tradução de sinais, proliferação celular e contração muscular. O presente trabalho teve como objetivo a caracterização estrutural e funcional de uma fosfolipase 'A IND. 2' ácida tóxica(BmooTX-I) isolada da peçonha da serpente Bothrops moojeni. A BmooTX-I foi purificada por uma combinação de cromatografias em resinas de troca iônica (DEAE-Sephacel), exclusão molecular (Sephadex G-75) e interação hidrofóbica (Phenyl-Sepharose CL-4B). A confirmação do grau de pureza foi realizada através de análise por espectrometria de massa MALDI TOF da BmooTX-I reduzida (monômero, 13.802,66 Da) e não reduzida (dímero, 27.506,38 Da), da focalização isoelétrica (p/4,2) e de SDS-PAGE. A região N-terminal da enzima apresentou alta homologia com outras 'PLA. IND. 2s' Asp49 de peçonhas de serpentes. A BmooTX-I apresentou também elevada atividade fosfolipásica e induziu edema moderado in vivo. Além disso, foi capaz de inibir a agregação plaquetária e a coagulação do plasma, induzir a liberação de 'PGI IND. 2' por HUVECs e apresentar efeito citotóxico sobre células tumorais, bactérias efungos. O tratamento da enzima com o reagente brometo de p-bromofenacila (BPB) neutralizou a atividade enzimática e de inibição da agregação plaquetária. A determinação da miotoxicidade foi realizada através da dosagem dos níveis de CK no plasma de camundongos previamente injetados com a toxina. A análise histopatológica das fibras musculares demonstrou a presença de infiltrado inflamatório e líquido intercelular, ambos confirmados pela análise ) ultra-estrutural. O presente trabalho deverá contribuir para a elucidação e determinação da composição bioquímica dos venenos animais, já que as fosfolipases 'A IND. 2' ácidas tóxicas possuem mecanismos de ação ainda não totalmente esclarecidos
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2009
- Data da defesa: 24.04.2009
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ABNT
SANTOS FILHO, Norival Alves. Caracterização funcional e estrutural de uma fosfolipase 'A IND. 2' ácida tóxica isolada da peçonha de Bothrops moojeni. 2009. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2009. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60134/tde-27042009-134139/. Acesso em: 19 set. 2024. -
APA
Santos Filho, N. A. (2009). Caracterização funcional e estrutural de uma fosfolipase 'A IND. 2' ácida tóxica isolada da peçonha de Bothrops moojeni (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60134/tde-27042009-134139/ -
NLM
Santos Filho NA. Caracterização funcional e estrutural de uma fosfolipase 'A IND. 2' ácida tóxica isolada da peçonha de Bothrops moojeni [Internet]. 2009 ;[citado 2024 set. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60134/tde-27042009-134139/ -
Vancouver
Santos Filho NA. Caracterização funcional e estrutural de uma fosfolipase 'A IND. 2' ácida tóxica isolada da peçonha de Bothrops moojeni [Internet]. 2009 ;[citado 2024 set. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60134/tde-27042009-134139/
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