Métodos alternativos de purificação do polissacarídeo capsular de Haemophilus influenzae tipo b (2009)
- Authors:
- Autor USP: ALBANI, SILVIA MARIA FERREIRA - BIOTECNOL
- Unidade: BIOTECNOL
- Subjects: POLISSACARÍDEOS BACTERIANOS; HAEMOPHILUS; HIDRÓLISE; CROMATOGRAFIA DE PERMEAÇÃO EM GEL; BIOTECNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Haemophilus influenzae tipo b é uma bactéria Gram-negativa, patogênica causadora de meningites em crianças. A cápsula polissacarídica (PSb) é o principal fator de virulência e é usado como antígeno vacinal. O método clássico de purificação do PSb envolve várias etapas de precipitação com etanol, fenol e detergente catiônico (inflamável, corrosivo e tóxico), e etapas de ultracentrifugação. O objetivo deste estudo foi substituir total ou parcial as precipitações e/ou uso das centrífugas por cromatografia, digestão enzimática, microfiltração e ultrafiltração tangencial. As cromatografias de troca iônica e de filtração em gel não apresentaram boas purificações, entretanto a hidrofóbica pode eliminar as proteínas contaminantes. As precipitações com etanol foram necessárias para obter a pureza requerida. O etanol de alguma forma favoreceu a ação enzimática e facilitou a posterior ultrafiltração. A separação com etanol em fibra-oca de microfiltração tangencial mostrou melhores purificações do que a centrifugação, mas com uso repetido verificou-se redução na eficiência
- Imprenta:
- Data da defesa: 02.02.2009
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ABNT
ALBANI, Silvia Maria Ferreira. Métodos alternativos de purificação do polissacarídeo capsular de Haemophilus influenzae tipo b. 2009. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2009. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-17042009-174554/. Acesso em: 14 nov. 2024. -
APA
Albani, S. M. F. (2009). Métodos alternativos de purificação do polissacarídeo capsular de Haemophilus influenzae tipo b (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-17042009-174554/ -
NLM
Albani SMF. Métodos alternativos de purificação do polissacarídeo capsular de Haemophilus influenzae tipo b [Internet]. 2009 ;[citado 2024 nov. 14 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-17042009-174554/ -
Vancouver
Albani SMF. Métodos alternativos de purificação do polissacarídeo capsular de Haemophilus influenzae tipo b [Internet]. 2009 ;[citado 2024 nov. 14 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-17042009-174554/
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