Estudos estruturais de histatina-5 e seu análogo, TOA 'C POT.0'-histatina-5: Interação com metais e sistemas biomiméticos (2008)
- Authors:
- Autor USP: DYSZY, FÁBIO HENRIQUE - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: PEPTÍDEOS (SÍNTESE); FLUORESCÊNCIA (APLICAÇÕES); RESSONÂNCIA PARAMAGNÉTICA ELETRÔNICA (APLICAÇÕES); MEMBRANAS (BIOLOGIA); RELAÇÕES ESTRUTURA-ATIVIDADE
- Language: Português
- Abstract: O mecanismo de ação da Histatina-5 (Hst-5), um peptídeo antimicrobiano da saliva humana com ação fungicida, não está esclarecido. Dicroísmo circular (CD), fluorescência e ressonância paramagnética eletrônica (RPE) foram empregados para examinar as propriedades conformacionais de Hst-5 e seu análogo contendo o aminoácido paramagnético TOAC N-terminal (TOAC'C POT.0'-Hst-5) em solução aquosa, em função do pH, de TFE, e de íons metálicos, e em presença de membranas modelo de composição. Foi examinada a atividade dos dois peptídeos em membranas lipídicas planas, na permeabilização de membranas modelo e frente o fungo Candida albícans e eritrócitos humanos, com o objetivo de estabelecer correlações entre a atividade e a estrutura dos peptídeos. Estudos de fluorescência mostraram a capacidade de TOAC de suprimir a fluorescência e que o pK dos resíduos de Tyr foram deslocados. Espectros de CD mostraram pequenas flutuações conformacionais, mas foram mantidas estruturas ao acaso. Espectros de RPE de TOA'C POT.0'-Hst-5 mostraram a coexistência de duas populações, protonada e desprotonada, em troca lenta. A partir de medidas de desdobramento hiperfino (aN), foram calculados pKs de TOAC; a relação de altura dos picos de campo central e alto também foi sensível à titulação do peptídeo. Em TFE os peptídeos adotaram conformação a-helicoidal (CD). Espectros de fluorescência de Hst-5 mostraram aumento da fluorescência, e os de TOA'C POT.0'-Hst-5 mostraram supressão, indicandoaproximação de TOAC dos resíduos de Tyr. Espectros de RPE de TOACO-Hst-5 também refletiram as mudanças conformacionais. Estudos de fluorescência mostraram a interação de Hst-5 e TOA'C POT.0'-Hst-5 com 'Cu POT.2+', 'Mn POT.2+' e 'Zn POT.2+', permitindo o cálculo de constantes de ligação. Espectros de CD refletiram pequenas variações conformacionais, sem aquisição de estrutura secundária. Espectros de RPE de TOA'C POT.0'-Hst-5 ) na presença dos íons paramagnéticos 'Cu POT.2+' e 'Mn POT.2+' indicaram interações spin-spin, permitindo o cálculo das distâncias metal-nitróxido. Curvas de tempo de correlação rotacional em função da concentração dos íons permitiram calcular constantes de ligação da mesma ordem de grandeza daquelas obtidas por fluorescência. Hst-5 e TOA'C POT.0'-Hst-5 ligaram-se em maior extensão a micelas negativas do que a zwitteriônicas num processo pH-dependente. Estudos de supressão de fluorescência por acrilamida confirmaram esses resultados, indicando a modulação por interações eletrostáticas. Espectros de CD mostraram que os peptídeos adotam conformação em dobra 'BETA' tipo I. Estudos de RPE da interação de TOA'C POT.0'-Hst-5 com vesículas de composição lipídica mimetizando membranas de E. coli e C. albícans (carga líquida negativa) e eritrócitos (carga líquida zero) confirmaram essa modulaçao
- Imprenta:
- Data da defesa: 09.09.2008
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ABNT
DYSZY, Fabio Henrique. Estudos estruturais de histatina-5 e seu análogo, TOA 'C POT.0'-histatina-5: Interação com metais e sistemas biomiméticos. 2008. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2008. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-03122008-140645/. Acesso em: 16 fev. 2026. -
APA
Dyszy, F. H. (2008). Estudos estruturais de histatina-5 e seu análogo, TOA 'C POT.0'-histatina-5: Interação com metais e sistemas biomiméticos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-03122008-140645/ -
NLM
Dyszy FH. Estudos estruturais de histatina-5 e seu análogo, TOA 'C POT.0'-histatina-5: Interação com metais e sistemas biomiméticos [Internet]. 2008 ;[citado 2026 fev. 16 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-03122008-140645/ -
Vancouver
Dyszy FH. Estudos estruturais de histatina-5 e seu análogo, TOA 'C POT.0'-histatina-5: Interação com metais e sistemas biomiméticos [Internet]. 2008 ;[citado 2026 fev. 16 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-03122008-140645/
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