Papel de um regulador de transcrição da família BLAI na resposta a estresse oxidativo em Caulobacter crescentus (2008)
- Authors:
- Autor USP: MARQUES, MARILIS DO VALLE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: O genoma da α-proteobactéria Caulobacter crescentus apresenta três reguladores de transcrição da família BlaI. O único mecanismo bem estudado envolvendo os membros desta família é o mecanismo de resistência a antibióticos -lactâmicos. No sistema BlaI, a proteína BlaR1 é uma sensora do β-lactâmico, que ao se ligar ao antibiótico é auto-clivada, liberando seu domínio citoplasmático que vai clivar o dímero do repressor BlaI, aumentando assim os níveis de transcrição da -lactamase. Previamente, demonstramos que uma linhagem mutante interrompida pelo transposon miniTn5lacZ em um gene que codifica um regulador de transcrição da família BlaI (CC1640) em C. crescentus mostrou sensibilidade a Cd2+ e Zn2+. A jusante deste gene está o gene CC1639, um ortólogo de BlaR1, e foi visto que estes genes fazem parte do mesmo transcrito. Com o objetivo de verificar se este regulador está envolvido na expressão de outros genes, foi construído o mutante nulo SP2011. Através de teste de viabilidade as linhagens mutantes CC1640::Tn5 e SP2011 mostraram ser mais sensíveis a peróxido de hidrogênio. A região promotora do operon CC1640/CC1639 foi clonada no vetor pRKlacZ290, em frente ao gene repórter lacZ.) Os resultados de ensaio de atividade de -Galactosidase, realizados nas linhagens NA1000 e SP2011, indicaram que o gene é induzido em fase estacionária e apresenta uma auto-regulação negativa. Para investigar se a auto-regulação é direta ouindireta a proteína codificada pelo gene CC1640 foi expressa heterologamente em E. coli, purificada e usada em ensaio de mobilidade em gel que confirmou a ligação direta da proteína BlaI no seu promotor. Genes localizados próximos ao operon CC1640/CC1639 no genoma de C. crescentus, foram analisados quanto a sua regulação por BlaI. Análise por RT-PCR semi-quantitativo com três destes genes candidatos mostrou que BlaI (CC1640) parece agir como repressor da expressão do gene CC1638, enquanto os outros dois genes testados, CC1636 e CC1634, não apresentaram nenhuma alteração no padrão de expressão.
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- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
-
ABNT
BRAZ, V. S. et al. Papel de um regulador de transcrição da família BLAI na resposta a estresse oxidativo em Caulobacter crescentus. 2008, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2008. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Braz, V. S., Valença, E. Y., Santos, E. S., & Marques, M. do V. (2008). Papel de um regulador de transcrição da família BLAI na resposta a estresse oxidativo em Caulobacter crescentus. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Braz VS, Valença EY, Santos ES, Marques M do V. Papel de um regulador de transcrição da família BLAI na resposta a estresse oxidativo em Caulobacter crescentus. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Braz VS, Valença EY, Santos ES, Marques M do V. Papel de um regulador de transcrição da família BLAI na resposta a estresse oxidativo em Caulobacter crescentus. Resumos. 2008 ;[citado 2024 abr. 24 ] - Estudo da participação da proteína Rho na regulação do estresse oxidativo mediado por KatG em Caulobacter crescentus
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