Trabalho de evento

Caracterização preliminar da delta-1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase de Trypanosoma cruzi (2008)

• Authors:
  • Suárez, B. A.
  • Paes, L. S.
  • Silber, Ariel Mariano
• Autor USP: SILBER, ARIEL MARIANO - ICB
• Unidade: ICB
• Assunto: PARASITOLOGIA
• Language: Português
• Abstract: Métodos e Resultados: Amplificação por PCR, clonagem no vetor pGEM T-Easy e seqüenciamento do gene TcP5CDh (1,7 Kb), usando DNA genómico da cepa CL-14 de Trypanosoma cruzi. O gene foi subclonado no vetor pYES (Invitrogen) para os ensaios de transformação da levedura S. cerevisiae mutante no gene ortologo PUT2. As leveduras complementadas foram crescidas em meios seletivos selecionando os clones positivos pela auxotrofia a uracilo e depois transferidos a um meio com prolina como única fonte de Nitrogênio. Uma transformação usando o vetor vazio foi usada como controle. A proteína TcP5CDh recombinante foi expressa usando 0,3 mM de IPTG em células de E. coli BL-21(DE3) pLysS, o produto expresso é insolúvel e a purificação ainda esta sendo otimizada. A analise dos níveis mRNA foi feita usando cDNAs das correspondentes formas de vida do parasita (epimastigotas, tripomastigotas, amastigotas, epimastigota-like, metacíclico) obtidas in vitro. O gene normalizador empregado foi o GAPDH. A caracterização cinética da enzima nas formas epimastigotas é feita no sentido reverso da reação usando glutamato e NADH/NAD(P)H como substratos e monitorando produção de P5C de forma colorimétrica a 443 nm ou oxidação do NADH a 340 nm. Conclusão: O organismo em estudo possui um gene funcional para a segunda enzima do catabolismo da prolina, via chave nos processos de diferenciação celular das formas de vida. A expressão dos RNAs mensageiros difere segundo o estagio e vida, sendo aforma intracelular epimastigota-like onde émais expressa, resultado acorde com previas publicações para o transporte de prolina nesse estagio. A reação catalisada pela enzima TcP5CDh é reversível mostrando afinidade pelo NADH/NAD(P)H, assim como foi demonstrado para a outra enzima ativa nessa via metabólica.
• Imprenta:
  • Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
  • Publisher place: São Paulo
  • Date published: 2008
• Source:
  • Título: Resumos
• Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo

---

How to cite

A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

• ABNT

  SUÁREZ, B. A. e PAES, L. S. e SILBER, Ariel Mariano. Caracterização preliminar da delta-1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase de Trypanosoma cruzi. 2008, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2008. . Acesso em: 09 out. 2024.

• APA

  Suárez, B. A., Paes, L. S., & Silber, A. M. (2008). Caracterização preliminar da delta-1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase de Trypanosoma cruzi. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP.

• NLM

  Suárez BA, Paes LS, Silber AM. Caracterização preliminar da delta-1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase de Trypanosoma cruzi. Resumos. 2008 ;[citado 2024 out. 09 ]

• Vancouver

  Suárez BA, Paes LS, Silber AM. Caracterização preliminar da delta-1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase de Trypanosoma cruzi. Resumos. 2008 ;[citado 2024 out. 09 ]

Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

• Application of magnetically induced hyperthermia in the model protozoan Crithidia fasciculata as a potential therapy against parasitic infections
• RNA aptamers as inhabitors of the glucose transport in Trypanosoma
• A mitochondrial proline dehydrogenase of Trypanosoma cruzi (TcPRODH) participates of respiration chain and regulated during life satage
• Cloning of genes for putatives proline dehydrogenase and Δ1-pyproline-5-carboxilate dehydrogenase from Leishmania (LEISHMANIA) amazonensis and functional characterization of their products
• On the evolution of hexose transporters in kinetoplastid potozoans
• Cysteine synthase: multiple structures of a key enzyme in cysteine synthesis and a potential drug target for Chagas disease and leishmaniasis
• Procyclic trypanosomes recycle glucose catabolites and TCA cycle intermediates to stimulate growth in the presence of physiological amounts of proline
• Nucleosome landscape reflects phenotypic differences in Trypanosoma cruzi life forms
• Development of RNA aptamers as inhibitors of the glucose permease in Trypanosoma cruzi
• Trypanosoma cruzi infective and proliferative forms use distinct mechanisms to inhibit DNA