Identificação de fostoproteínas em células de uma linhagem de linforma do manto (2008)
- Authors:
- Autor USP: FERREIRA, GERMANO AGUIAR - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: LINFOMA; CÉLULAS (IDENTIFICAÇÃO); ESPECTROMETRIA DE MASSAS; BIOLOGIA CELULAR; BIOLOGIA MOLECULAR
- Language: Português
- Abstract: O estudo fosfoproteômico de células linfóides pode contribuir para a compreensão de sua origem através da elucidação das vias responsáveis pelo escape dessas do controle celular. A abordagem proteômica foi utilizada no estudo inicial da linhagem GRANTA-519, uma linhagem celular estabelecida de linfoma de células do manto, através da criação de um inventário inicial de identificação de proteínas com possíveis modificações pós-traducionais, especialmente fosforilações. Inicialmente as células de GRANTA-519 foram cultivadas em condições adequadas. Proteínas foram extraídas com tampão de lise contendo 7,7 M de uréia, 2,2 M de tiouréia, 4,4 % de CHAPS e uma mistura de cocktail inibidor de proteases. Após extração das proteínas do extrato celular, alíquotas de proteínas foram tratadas com 'lâmbda'PPase e submetidas a focalização isoelétrica em faixa de pH de 4,0 -7,0 e eletroforese em gel de poliacrilamida e SDS preparados em nosso laboratório. Proteínas foram detectadas através de coloração com coomassie coloidal G-250, coloração específica para fosfoproteínas e anticorpos específicos contra resíduos fosforilados de serina e tirosina. Mapas bidimensionais foram analisados utilizando o software ImageMaster Platinum. Vinte oito spots de um total de duzentos, cerca de'+ OU -' 14%, desapareceram após o tratamento com fosfatase alcalina. Proteínas modificadas pelo tratamento passaram por digestão in situ com tripsina e os peptídeos tripsínicos submetidos a espectrometria demassas em equipamentos do tipo MALDI- ToF e ESI triplo quádruplo. Doze proteínas dos spots digeridos, selecionados após o tratamento com 'lâmbda'PPase, foram identificados. As seguintes proteínas foram identificadas em mais de um spot alinhado horizontalmente: Nucleofosmina, uma proteína fosforilada envolvida com acetilação nucleolar e Anexina A6, uma proteína reguladora de cálcio extremamente conservada. Outras proteínas escolhidas após o tratamento com 'lâmbda'PPase foram identificadas como Heat shock 70 kDa protein 1, Stress-70 protein, mitochondrial, Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein H, Tumor protein D52, Actin-related protein 2/3 complex subunit 5, Eukaryotic translation initiation factor 5A-1 e Rho GDP-dissociation inhibitor 1
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2008
- Data da defesa: 27.11.2008
-
ABNT
FERREIRA, Germano Aguiar. Identificação de fostoproteínas em células de uma linhagem de linforma do manto. 2008. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2008. . Acesso em: 28 dez. 2025. -
APA
Ferreira, G. A. (2008). Identificação de fostoproteínas em células de uma linhagem de linforma do manto (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Ferreira GA. Identificação de fostoproteínas em células de uma linhagem de linforma do manto. 2008 ;[citado 2025 dez. 28 ] -
Vancouver
Ferreira GA. Identificação de fostoproteínas em células de uma linhagem de linforma do manto. 2008 ;[citado 2025 dez. 28 ] - Avaliação dos efeitos do alquilfosfolipídio perifosine sobre uma linhagem de linfoma de células do manto, Granta-519
- The expression of NTAL and its protein interactors is associated with clinical outcomes in acute myeloid leukemia
- Sequesterpene lactones isolated from a Brazilian cerrado plant (Eremanthus spp.) as anti-proliferative compounds, characterized by functional and proteomic analysis, are candidates for new therapeutics in glioblastoma
- A proteomics outlook towards the elucidation of epithelial–mesenchymal transition molecular events
- The lipid raft protein NTAL participates in AKT signaling in mantle cell lymphoma
- Proteomic identification and time-course monitoring of secreted proteins during expansion of human mesenchymal stem/stromal in stirred-tank bioreactor
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- Disrupting membrane raft domains by alkylphospholipids
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