O efeito de guanosina tetrafosfato (ppGpp) sobre a adesão de Escherichia coli enteropatogênica (2008)
- Authors:
- Autor USP: SPIRA, BENY - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) é a principal causadora de diarréia em crianças de até um ano de idade em países em desenvolvimento. In vitro, EPEC adere de maneira localizada sobre a superfície das células epiteliais, formando microcolônias. Este fenótipo depende da fimbria BFP codificada pelo plasmídio EAF. Além disso, EPEC adere intimamente à célula hospedeira por meio da proteína intimina, codificada por eae, localizado em uma ilha de patogenicidade conhecida como LEE (locus of enterocyte effacement). O nucleotídeo guanosina tetrafosfato (ppGpp) é um regulador global em bactérias. Existem duas vias para a síntese de ppGpp. Uma delas é via RelA. A outra é via SpoT, que além da função de síntese, também é responsável degradação da molécula, evitando o seu acúmulo na célula. A carência de aminoácidos, bem como outros nutrientes induzem a síntese de ppGpp, que por sua vez causa a diminuição do crescimento bacteriano. ppGpp também está relacionado à regulação de virulência em varias bactérias. O objetivo deste trabalho foi estudar a relação entre ppGpp e a adesão e expressão das duas principais adesinas de EPEC. Mutações nos genes relA e spoT foram transferidas para EPEC por transdução por fago P1. O nível de ppGpp das bactérias foi medido pela incorporação de 32P em bactérias crescidas sob carência de aminoácidos em meio mínimo. Utilizando cromatografia em placa delgada foi possível isolar e medir as moléculas de ppGpp cujo 32P foiincorporado. O duplo mutante relA/spoT foi incapaz de sintetizar ppGpp. Sob carência de aminoácidos, a linhagem selvagem de EPEC produziu altos níveis de ppGpp, ao contrário do mutante relA, cujo nível de ppGpp foi menor em relação ao nível basal, confirmando o fenótipo esperado para os mutantes. ) A presença de ppGpp é essencial para a adesão e expressão de adesinas em EPEC. Ensaios de adesão in vitro com células epiteliais humanas da linhagem Hep-2 mostraram que a ausência de produção de ppGpp no duplo mutante relA/spoT praticamente aboliu a adesão de EPEC. Análises dos níveis de RNAm por northern-blot e de proteínas por western-blot revelaram que na ausência de ppGpp não foi detectada a expressão de bfpA (gene que codifica a pilina de BFP) e BFP, respectivamente. De maneira semelhante esse duplo mutante mostrou menos expressão de eae e intimina. Quando os mesmos testes foram realizados com o mutante relA, o nível de adesão foi reduzido à metade e o efeito não foi tão significativo em relação a expressão das adesinas BFP e intimina, como no mutante relA/spoT. Resultados preliminares com a inserção in cis dos genes selvagens relA e spoT mostraram que houve a complementação das mutações com relação aos fenótipos analisados. Esses resultados mostram que ppGpp tem um papel fundamental sobre a adesão de EPEC.
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- Publisher: Sociedade Brasileira de Genética
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Programa
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Genética
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ABNT
FERREIRA, G. M. e SPIRA, Beny. O efeito de guanosina tetrafosfato (ppGpp) sobre a adesão de Escherichia coli enteropatogênica. 2008, Anais.. Ribeirão Preto: Sociedade Brasileira de Genética, 2008. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Ferreira, G. M., & Spira, B. (2008). O efeito de guanosina tetrafosfato (ppGpp) sobre a adesão de Escherichia coli enteropatogênica. In Programa. Ribeirão Preto: Sociedade Brasileira de Genética. -
NLM
Ferreira GM, Spira B. O efeito de guanosina tetrafosfato (ppGpp) sobre a adesão de Escherichia coli enteropatogênica. Programa. 2008 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Ferreira GM, Spira B. O efeito de guanosina tetrafosfato (ppGpp) sobre a adesão de Escherichia coli enteropatogênica. Programa. 2008 ;[citado 2024 abr. 19 ] - Strain variation in ppGpp concentration and RpoS levels in laboratory strains of Escherichia coli K-12
- RT-PCR of long prokaryotic operon transcripts without DNase treatment
- Mutações no operon pst afetam a adesão de Escherichia coli enteropatogênica
- Regulação da fosfotase alcalina pelo fator sigma S em RNA polimerase em Escherichia coli
- Regulação da fosfatase alcalina pelo fator SigmaS da RNA polimerase em Escherichia coli
- Análise transcricional do operon pst de Escherichia coli
- Variation in stress responses within a bacterial species and the indirect costs of stress resistance
- The effect of IHF on 'sigma' S selectivity of the phoA and pst promoters of Escherichia coli
- The pst operon of enteropathogenic Escherichia coli enhances bacterial adherence to epithelial cells
- The uncertain consequences of transferring bacterial strains between laboratories – rpoS instability as an example
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