Monitorização da produção de oxigênio singlete (1o2) em neutrófilos, monócitos e macrófagos através da sonda 9,10-difenilantraceno por microscopia confocal (2008)
- Authors:
- USP affiliated authors: RUSSO, MOMTCHILO - ICB ; CATALANI, LUIZ HENRIQUE - IQ ; CAMPA, ANA - FCF
- Unidades: ICB; IQ; FCF
- Assunto: IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos Oxigênio singlete (1O2) é uma espécie reativa de oxigênio produzida pela reação de peróxido de hidrogênio e ácido hipocloroso. Este último é gerado a partir de reação catalisada pela enzima mieloperoxidase (MPO). Como as espécies envolvidas nestas reações têm meia vida curta espera-se que a produção de 1O2 se localize em regiões próximas a localização de MPO. Acredita-se que o 1O2 esteja envolvido tanto em processos microbicidas quanto na sinalização celular. Desta forma, sugerimos que a localização intracelular da MPO sirva como base para a diferenciação dos processos mediados por 1O2. Assim, por exemplo, em algumas células, a MPO está presente predominantemente em grânulos que se fundem ao fagolisossomo; em outras células há uma distribuição perinuclear de MPO. Para que pudéssemos avaliar esta hipótese tivemos que padronizar condições para a análise de formação de 1O2 por microscopia confocal. Para tanto otimizamos condições de análise para células humanas e de animais de experimentação. Métodos e resultados 9,10-difenilantraceno (DPA) foi usado como sonda para 1O2; quando reage com 1O2 forma um endoperóxido perdendo sua fluorescente.) Zimosan (Zy) opsonizado (1,0 x 107 partículas/mL) marcado com DPA a 37ºC por 1 hora foi adicionado a células polimorfonucleares (PMN), monócitos e macrófagos (1,0 x 107 células/mL) e imediatamente adicionada às lâminas para obtenção de imagens por microscopia confocal de varredura a laser. As imagens foramcaptadas durante 20 minutos com um intervalo de 1 minuto entre cada uma. Condições de marcação do Zy e obtenção das imagens foram padronizadas em um microscópio confocal Zeiss LSM 510. Nas seqüências de tomada de imagens observamos um decréscimo de fluorescência do DPA, ou seja, a produção de 1O2 para todas as células, desde que estejam ativadas. Conclusão O método mostrou-se eficiente e permitiu boa resolução de imagens. Com o método evidenciamos diferenças na produção de 1O2 dependendo da célula. Estas diferenças devem-se, provavelmente, ao conteúdo de MPO em cada uma destas células e sua compartimentalização.
- Imprenta:
- Publisher place: Águas de Lindóia
- Date published: 2008
- Source:
- Título: Programa
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE
-
ABNT
CRUZ, Wilton Antonio da Silva et al. Monitorização da produção de oxigênio singlete (1o2) em neutrófilos, monócitos e macrófagos através da sonda 9,10-difenilantraceno por microscopia confocal. 2008, Anais.. Águas de Lindóia: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, 2008. . Acesso em: 24 abr. 2025. -
APA
Cruz, W. A. da S., Garcia, F., Russo, M., Catalani, L. H., Castro, J. M. de A., & Campa, A. (2008). Monitorização da produção de oxigênio singlete (1o2) em neutrófilos, monócitos e macrófagos através da sonda 9,10-difenilantraceno por microscopia confocal. In Programa. Águas de Lindóia: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Cruz WA da S, Garcia F, Russo M, Catalani LH, Castro JM de A, Campa A. Monitorização da produção de oxigênio singlete (1o2) em neutrófilos, monócitos e macrófagos através da sonda 9,10-difenilantraceno por microscopia confocal. Programa. 2008 ;[citado 2025 abr. 24 ] -
Vancouver
Cruz WA da S, Garcia F, Russo M, Catalani LH, Castro JM de A, Campa A. Monitorização da produção de oxigênio singlete (1o2) em neutrófilos, monócitos e macrófagos através da sonda 9,10-difenilantraceno por microscopia confocal. Programa. 2008 ;[citado 2025 abr. 24 ] - Melatonin oxidation in macrophages
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