Efeito da angiotensina II sobre o trocador NA+/H+ (NHE1) via complexo cálcio-calmodulina (2008)
- Authors:
- USP affiliated author: SOUZA, MARIA OLIVEIRA DE - ICB
- School: ICB
- Subject: FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos A isoforma 1 do trocador Na+/H+ humano (hNHE1) apresenta 2 sítios de interação com o complexo cálcio-calmodulina (sítios A e B).O objetivo desse trabalho é investigar como a ANG II modula a atividade do hNHE1 via cálcio-calmodulina. Métodos e resultados Realizamos, por reações de PCR, mutações no sítio A do hNHE1, substituindo os aminoácidos lisina (641) e argininas (643, 645 e 647) por ácidos glutâmicos (Mut1 SA) ou por glutaminas (Mut2 SA). Em seguida, clonamos o hNHE1 (selvagem ou mutantes) no vetor de expressão pcDNA3.1 e coexpressamos cada recombinante com hAT1/pEGFP-N1 (vetor fluoresecente), em células PS120. A atividade do hNHE1 foi avaliada por medidas de pH intracelular (pHi), utilizando a sonda fluorescente BCEFC/AM. A velocidade de recuperação do pHi (dpHi/dt) foi avaliada nos 2 primeiros minutos após o pulso ácido com NH4Cl. Os resultados indicam que em células transfectadas com hNHE1 selvagem, a dpHi/dt controle foi [0.119 ± 0.018 (6) unidades de pH/minuto]. Este parâmetro foi significantemente aumentado com ANGII (10-12 M) [0.164 ± 0.010 (6)], e não foi alterado com ANG II (10-6 M) [0.114 ± 0.002 (2)]. Em células transfectadas com os mutantes de hNHE1, a dpHi/dt controle foi reduzida em relação ao grupo selvagem [0.080 ± 0.013 (8), Mut1 SA e 0.072 ± 0.004 (8), Mut2 SA]. Entretanto, estes valores não foram significantemente alterados com ANG II (10-12 M) [0.089 ± 0.005 (7) e 0.069± 0.011(6)], mas foram revertidos com ANG II(10-6 M)[0.113 ± 0.020 (6) e 0.106 ± 0.005 (6)]. Conclusão Baixa concentração de ANG II induz um pequeno aumento de cálcio no citosol, ativa o complexo cálcio-calmodulina e consequentemente, o sítio A do hNHE1. Qundo o sítio A está inativo devido às mutações, o sítio B intacto é ativado pelo grande aumento de cálcio, proporcionado pela alta concentração de ANG II. Nessa condição, o complexo cálcio-calmodulina,via sitio B, permite a atividade do hNHE1 acima do nível basal.
- Imprenta:
- Place of publication: Águas de Lindóia
- Date published: 2008
- Source:
- Título do periódico: Programa
- Conference title: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FeSBE
-
ABNT
EGUTI, Debora Mai Nakamura e OLIVEIRA-SOUZA, Maria. Efeito da angiotensina II sobre o trocador NA+/H+ (NHE1) via complexo cálcio-calmodulina. 2008, Anais.. Águas de Lindóia: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo, 2008. . Acesso em: 17 ago. 2022. -
APA
Eguti, D. M. N., & Oliveira-Souza, M. (2008). Efeito da angiotensina II sobre o trocador NA+/H+ (NHE1) via complexo cálcio-calmodulina. In Programa. Águas de Lindóia: Instituto de Ciências Biomédicas, Universidade de São Paulo. -
NLM
Eguti DMN, Oliveira-Souza M. Efeito da angiotensina II sobre o trocador NA+/H+ (NHE1) via complexo cálcio-calmodulina. Programa. 2008 ;[citado 2022 ago. 17 ] -
Vancouver
Eguti DMN, Oliveira-Souza M. Efeito da angiotensina II sobre o trocador NA+/H+ (NHE1) via complexo cálcio-calmodulina. Programa. 2008 ;[citado 2022 ago. 17 ] - Transportadores de membrana
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