Estudo da regulação do gene cspD de Caulobacter crescentus (2007)
- Authors:
- Autor USP: MARQUES, MARILIS DO VALLE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Caulobacter crescentus é uma bactéria que vem sendo estudada extensivamente por possuir um ciclo celular único, com diferenciação celular. Além disso, embora seja uma bactéria mesófila, é encontrada em amostras de água de lagos que congelam por completo no inverno. Caulobacter possui quatro genes de choque frio (cspA, cspB, cspC e cspD) sendo que, cspA e cspB são induzidos em resposta ao choque frio e cspC e cspD são induzidos em fase estacionária. O estudo do papel das proteínas com domínio de choque frio no processo de sobrevivência a baixas temperaturas é importante para a compreensão da resposta bacteriana a estresses como o frio, e sua correlação com a situação de parada de crescimento da fase estacionária. O objetivo deste trabalho é a identificação de sinais celulares e fatores de transcrição que regulam a expressão do gene cspD de Caulobacter crescentus. Inicialmente foi realizada uma varredura em uma biblioteca de 5.000 clones mutados pela inserção do transposon Tn5. Os clones mutantes da biblioteca foram conjugados com células de E. coli S17-1 contendo o plasmídeo pcspD/lacZ (promotor de cspD clonado à frente do gene repórter lacZ no plasmídeo pRKlacZ290). Através de ensaios de X-Gal e posteriormente ensaio de atividade de ?-galactosidase, foram selecionadas 6 linhagens mutantes que apresentaram baixa atividade enzimática em comparação ao controle positivo (linhagem NA1000 de Caulobacter crescentus conjugada com o plasmídeo pcspD/lacZ).) Através deseqüenciamento de DNA, foram identificados os genes interrompidos em 3 mutantes: CC0254 (proteína transportadora e de membrana); CC2587 (ABC Transporter); CC2518 (proteína hipotética). Segundo os resultados obtidos, observamos que esses genes podem estar na via de regulação A expressão de cspD de Caulobacter crescentus também foi avaliada em resposta a carência nutricional de carbono. A linhagem NA1000 contendo o plasmídeo pcspD/lacZ foi inoculada em meio mínimo contendo 0,02% de glicose ou em meio mínimo com 2% de glicose. Por ensaio de atividade de ?-galactosidase a expressão do gene foi medida em intervalos de tempo definidos. Notou-se um aumento significativo da indução do gene cspD nas células crescidas em meio mínimo com carência de carbono, o que demonstra que carência nutricional também é um fator que altera a expressão do gene cspD de Caulobacter crescentus
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Genética
- Publisher place: Águas de Lindóia
- Date published: 2007
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Genética
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ABNT
TAVARES-SILVA, C. A. P. e MARQUES, Marilis do Valle. Estudo da regulação do gene cspD de Caulobacter crescentus. 2007, Anais.. Águas de Lindóia: Sociedade Brasileira de Genética, 2007. . Acesso em: 19 out. 2024. -
APA
Tavares-Silva, C. A. P., & Marques, M. do V. (2007). Estudo da regulação do gene cspD de Caulobacter crescentus. In Resumos. Águas de Lindóia: Sociedade Brasileira de Genética. -
NLM
Tavares-Silva CAP, Marques M do V. Estudo da regulação do gene cspD de Caulobacter crescentus. Resumos. 2007 ;[citado 2024 out. 19 ] -
Vancouver
Tavares-Silva CAP, Marques M do V. Estudo da regulação do gene cspD de Caulobacter crescentus. Resumos. 2007 ;[citado 2024 out. 19 ] - Isolamento de mutantes deficientes na reposta a estresse osmótico em Caulobacter crescentus
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