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Regulação da expressão gênica pelo pH no fungo filamentoso Aspergil/us nidulans: funcionalidade do gene palA (2008)

  • Authors:
  • Autor USP: SILVA, EMILIANA MANDARANO DA - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBI
  • Subjects: ASPERGILLUS; EXPRESSÃO GÊNICA; FUNGOS
  • Language: Português
  • Abstract: A via transdutora de sinal mediada pelo fator de transcrição PacC atua em muitos eventos metabólicos envolvidos na resposta adaptativa ao pH alcalino em Aspergi//us nidulans. O gene pacC codifica um fator de transcrição zinc-finger, e os seis genes pai (A, B, C, F, H e I) são membros putativos de uma cascata sinalizadora que promovem a ativação proteolítica de PacC em ambiente alcalino. A proteína PalA interage com os motivos YPXL/I em PacC, o que é necessário para a ação de PaIB, uma protease da família das calpaínas. Assim, qualquer que seja o pH de cultivo, a mutação palA 1 deveria mimetizar o fenótipo selvagem. Este modelo implica que mutações acarretando perda de função em qualquer dos genes pai levariam a mimetização do fenótipo ácido (selvagem) independentemente do pH ambiente, o que não foi observado na linhagem mutante biA1 palA1.Com a finalidade de identificar genes envolvidos na resposta adaptativa ao pH ambiente e avançar no entendimento da funcionalidade do gene palA em pH ácido, a hibridação subtrativa por supressão foi realizada a partir dos mRNAs isolados das linhagens biA 1 (requer biotina; Fungal Genetic Stock Center, linhagem #A26) e biA1 palA1 (mimetiza crescimento de pH ácido; Fungal Genetic Stock Center, linhagem #A243) de A. nidulans cultivadas em condições de fosfato limitante, pH 5,0. Este estudo revelou genes com expressão elevada na linhagem mutante biA 1 palA 1 envolvidos em fidelidade mitótica, resposta ao estresse, mecanismos detransdução de sinal, desenvolvimento, estabilidade genômica, secreção enzimática, regulação pelo fosfato, etc. A expressão diferencial de oito desses genes, confirmada por Norlhern blot, indica que o gene palA tem função metabólica específica em pH ácido em A.nidulans. A análise estrutural das frações enzimáticas secretadas pela linhagem mutante biA 1 palA 1 em ambiente ácido mostrou que estas frações apresentaram níveis reduzidos de glicosilação e maior sensibilidade à temperatura em relação à linhagem selvagem biA1. O seqüenciamento das proteínas secretadas pela linhagem mutante biA 1 palA 1 em pH 5,0 revelou uma fosfatase ácida Pi-repressível e uma fosfolipase C codificadas pelos genes pacA e pIca, respectivamente. Além disso, o seqüenciamento das proteínas secretadas pela linhagem selvagem revelou isoformas da fosfatase ácida Pi- repressível codificada pelo gene pacA. Estes resultados indicam que o gene palA está envolvido em modificações pós-traducionais dessas enzimas e que, possivelmente, a proteína PalA é funcional em condições ácidas, promovendo a proteólise ou outro tipo de processamento molecular envolvido na ativação de PacC. Dessa forma, em função dos resultados apresentados neste trabalho e daqueles fornecidos pela literatura, foram propostas modificações para o modelo hierárquico previamente estabelecido
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 25.02.2008

  • How to cite
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    • ABNT

      SILVA, Emiliana Mandarano da. Regulação da expressão gênica pelo pH no fungo filamentoso Aspergil/us nidulans: funcionalidade do gene palA. 2008. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2008. . Acesso em: 07 abr. 2026.
    • APA

      Silva, E. M. da. (2008). Regulação da expressão gênica pelo pH no fungo filamentoso Aspergil/us nidulans: funcionalidade do gene palA (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Silva EM da. Regulação da expressão gênica pelo pH no fungo filamentoso Aspergil/us nidulans: funcionalidade do gene palA. 2008 ;[citado 2026 abr. 07 ]
    • Vancouver

      Silva EM da. Regulação da expressão gênica pelo pH no fungo filamentoso Aspergil/us nidulans: funcionalidade do gene palA. 2008 ;[citado 2026 abr. 07 ]

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