Metabolismo de 'alfa'-metil glicosídio em Saccharomyces cerevisiae (2007)
- Authors:
- Autor USP: DA SILVA, MARCIA APARECIDA - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: TRANSPORTE ATRAVÉS DA MEMBRANA; BIOLOGIA CELULAR; SACCHAROMYCES (METABOLISMO)
- Language: Português
- Abstract: O transporte de 'alfa'-metil glicosídio ('alfa'-MG) em Saccharomyces cerevisiae foi recentemente reportado como transporte ativo, do tipo simporte de 'alfa'-MG com 'H POT.'POSITIVO'' mediado pela permease Agt1p. A cepa AP77-11B (cepa selecionada em nosso laboratório) transporta 'ANTPOT.14 C'-'alfa'-MG pelo mecanismo descrito como difusão facilitada porque não existe co-transporte de 'H POT.'POSITIVO'' durante 0 transporte de 'alfa'-MG. Os genes HXT1-HXT17 pertencem à família dos transportadores de hexoses em Saccharomyces cerevisiae. Então, nós decidimos investigar a possibilidade que o transporte de 'alfa'-MG poderia ser mediado pelos transportadores de hexoses. Nós demonstramos que cepa MC966A (tipo selvagem), KY73 (isogênica com MC966A mas deletada nos HXT1-7), BSY08 (isogênica com KY73 com o AGT1 deletado), BSY09 (isogênica com MC966A com o AGT1 deletado) e a EBY.VW4000 (hxt1-17 agt1 gal2-null), não cresceram em 'alfa'-MG como fonte de carbono. Além disso, estas cepas não transportaram 'alfa'-MG por difusão facilitada quando as células foram cultivadas em meio com maltose, levando-nos a concluir que os transportadores de hexoses não estavam envolvidos no transporte de 'alfa'-MG. Nós observamos que a cepa AP77-11B apresentou alta atividade de 'alfa'-metilglicosidase periplásmica quando as células foram cultivadas em 'alfa'-MG. Esta atividade enzimática foi ensaiada usando um método descrito primeiramente para invertase periplásmica, no qual ascélulas eram incubadas com fluoreto de sódio, um inibidor da enolase, antes da incubação com 'alfa'-MG. Então, a glicose produzida durante a hidrólise do 'alfa'-MG poderia ser determinada. A atividade extracelular só está presente em células cultivadas em 'alfa'-MG. Células ) de-reprimidas não mostraram atividade de 'alfa'-metilglicosidase. Os parâmetros cinéticos determinados para 'alfa'-metilglicosidase, indicaram que esta enzima tem baixa afinidade para o 'alfa'-MG. Além do mais, a atividade específica da 'alfa'-metilglicosidase periplásmica aumentou ao longo da curva de crescimento em 'alfa'-MG. Os resultados reportados mostraram que existem duas vias de utilização de 'alfa'-MG em Saccharomyces cerevisiae. Uma via é mediada pela Agt1p, responsável pelo transporte ativo de 'alfa'-MG. Na outra via, a 'alfa'-metilglicosidase é secretada para o espaço periplásmico das células. Então, a glicose produzida pela hidrólise do 'alfa'-MG é transportada pelos transportadores de hexoses por difusão facilitada
- Imprenta:
- Data da defesa: 07.12.2007
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ABNT
DA SILVA, Marcia Aparecida. Metabolismo de 'alfa'-metil glicosídio em Saccharomyces cerevisiae. 2007. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2007. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30012008-140526/. Acesso em: 03 out. 2024. -
APA
Da Silva, M. A. (2007). Metabolismo de 'alfa'-metil glicosídio em Saccharomyces cerevisiae (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30012008-140526/ -
NLM
Da Silva MA. Metabolismo de 'alfa'-metil glicosídio em Saccharomyces cerevisiae [Internet]. 2007 ;[citado 2024 out. 03 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30012008-140526/ -
Vancouver
Da Silva MA. Metabolismo de 'alfa'-metil glicosídio em Saccharomyces cerevisiae [Internet]. 2007 ;[citado 2024 out. 03 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-30012008-140526/ - Mapping the amino acids involved in sugar transport by the AGT1 transporter in Saccharomyces cerevisiae
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