Tese

Identificação e caracterização de subunidades catalíticas e reguladoras de proteínas fosfatases de Dictyostelim discoideum (2007)

• Authors:
  • Gonzalez-Kristeller, Daniela Carvalho
  • Da Silva, Aline Maria (Orientador)
• Autor USP: GONZALEZ-KRISTELLER, DANIELA CARVALHO - IQ
• Unidade: IQ
• Sigla do Departamento: QBQ
• Subjects: MICROBIOLOGIA (ESTUDO); BIOLOGIA MOLECULAR; PROTEÍNAS (IDENTIFICAÇÃO;CARACTERÍSTICAS); BIOLOGIA CELULAR
• Language: Português
• Abstract: As proteínas fosfatases são enzimas responsáveis pela desfosforilação de resíduos de fosfoaminoácidos, principalmente fosfotirosina e fosfoserina/treonina, o que divide esta classe de proteínas nas famílias PTP (proteína tirosina fosfatase) e PP (proteína serina/treonina fosfatase). Diversos membros da família das PPs, em particular da subfamília PPP (Phosphoprotein Phosphatase), existem como holoenzimas compostas de uma subunidade catalítica associada a uma ou mais subunidades reguladoras, que Ihes conferem diversidade funcional. Neste trabalho tivemos como objetivo identificar, utilizando ensaios no sistema de duplo híbrido em leveduras, proteínas que interagem com as subunidades catalíticas das serina/treonina fosfatases do tipo 1 (DdPP1c) e do tipo 4 (DdPP4c) da ameba social D. discoideum. Varreduras de bibliotecas de cDNA das fases de crescimento e desenvolvimento da Iinhagem AX4 de D. discoideum com as iscas DdPP1c e uma variante mutante da DdPP1c (DdPP1 cF269C) possibilitaram a identificação de pelo menos 30 genes com evidência de interação com a PP1c. A varredura das bibliotecas com a isca DdPP4 propiciou a identificação de 10 potenciais genes candidatos com evidência de interação com a PP4c. Várias dos candidatos identificados nas varreduras correspondem a genes que codificam para proteínas hipotéticas que não apresentam similaridade significativa com proteínas de função conhecida. Entre essas, identificamos e caracterizamos Ddl-3, um ortólogo doinibidor-3 da PP1c de mamíferos. A interação de Ddl-3 com DdPP1c foi confirmada através de ensaios independentes no sistema do duplo híbrido em leveduras. Demonstramos que Ddl-3 recombinante expresso em bactérias possui atividade inibidora da DdPP1c in vitro, ) sendo que esta enzima tem 50 `POR CENTO` de sua atividade de fosforilase fosfatase inibida por cerca de 0,55 nM de rDdl-3. Estes dados indicam que Ddl-3 é 50 vezes mais potente do que Ddl-2, um ortólogo do inibidor-2 previamente caracterizado em D. discoideum. Neste trabalho, também iniciamos a construção do catálogo (The Dictyostelium Phosphatome) que irá conter todas as subunidades catalíticas e reguladoras das proteínas fosfatases codificadas no genoma de D. discoideum. Até o momento, 101 genes foram catalogados e classificados nas diferentes famílias das proteínas fosfatases, sendo 16 na família das PTPs, 26 na família das DSPs (proteína fosfatase de dupla especificidade), 15 na família das PPMs (Phosphoprotein Phosphatase Magnesium-dependent) e 31 na família das PPPs, incluindo genes codificadores de subunidades catalíticas e reguladoras
• Imprenta:
  • Publisher place: São Paulo
  • Date published: 2007
• Data da defesa: 27.06.2007


---

How to cite

A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas

• ABNT

  GONZALEZ-KRISTELLER, Daniela Carvalho. Identificação e caracterização de subunidades catalíticas e reguladoras de proteínas fosfatases de Dictyostelim discoideum. 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2007. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-15112007-152052/. Acesso em: 03 out. 2024.

• APA

  Gonzalez-Kristeller, D. C. (2007). Identificação e caracterização de subunidades catalíticas e reguladoras de proteínas fosfatases de Dictyostelim discoideum (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-15112007-152052/

• NLM

  Gonzalez-Kristeller DC. Identificação e caracterização de subunidades catalíticas e reguladoras de proteínas fosfatases de Dictyostelim discoideum [Internet]. 2007 ;[citado 2024 out. 03 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-15112007-152052/

• Vancouver

  Gonzalez-Kristeller DC. Identificação e caracterização de subunidades catalíticas e reguladoras de proteínas fosfatases de Dictyostelim discoideum [Internet]. 2007 ;[citado 2024 out. 03 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-15112007-152052/

Últimas obras dos mesmos autores vinculados com a USP cadastradas na BDPI:

• Caracterização do mutante de desenvolvimento redA de Dictyostelium discoideum