Avaliação da transdução de sinal no receptor 'AT IND. 1' de angiotensina II através de mutações sítio-dirigidas (2007)
- Authors:
- Autor USP: REIS, ROSANA INÁCIO DOS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBI
- Subjects: RECEPTORES; SISTEMA RENINA-ANGIOTENSINA; PROTEÍNAS G
- Language: Português
- Abstract: A maioria dos efeitos fisiológicos desencadeados pela Angiotensina II, principal molécula efetora do Sistema Renina-Angiotensina, ocorre através da ativação do receptor AT IND. 1. O receptor AT IND. 1 pertence à família dos receptores acoplados à proteína-G e como tal, os resíduos de aminoácidos envolvidos com a transdução do sinal extracelular para o meio intracelular são aqueles localizados nas regiões transmembranares do receptor. O objetivo deste trabalho foi analisar o papel de resíduos de prolina localizados nas alfa-hélices transmembranas do receptor AT IND. 1 na transdução de sinal desencadeada mediante a ligação da Angiotensina II ao receptor. Os resíduos de prolina analisados neste projeto de tese foram: Pro POT. 82, Pro POT. 162, Pro POT. 207 e Pro POT. 285, os quais foram alterados através de mutação sítio-dirigida para Ala, gerando os receptores mutantes P82A, P162A, P207A e P285A. Os receptores mutantes foram analisados quanto à capacidade de ligação à Angiotensina II, através de ensaios de "binding" e funcionalmente através dos ensaios de acidificação extracelular, mobilização de cálcio intracelular e ativação da via de MAP quinases (ERK1/2). Os ensaios de "binding" mostraram que os receptores mutantes não apresentaram alteração significativa quanto à afinidade de ligação à Angiotensina II. Quanto aos ensaios funcionais, os mutantes P162A e P285A apresentaram um perfil de ativação similar ao receptor selvagem. Por outro lado,nossos resultados mostraram que a transdução de sinal da via clássica, extrapolada aqui para os ensaios de acidificação extracelular e mobilização de cálcio intracelular, foi drasticamente reduzida para o mutante P82A e praticamente nula para o mutante P207A, quando estimulados com a Angiotensina II. Apesar da ausência de resposta do mutante P207A ao estímulo da Angiotensina II nos ensaios de acidificação extracelular e mobilização de cálcio intracelular, constatamos que este receptor mutante poderia apresentar uma possível ativação espontânea, ou seja, independente do estímulo do agonista. Em relação ao ensaio de ativação de ERK, verificamos que ambos mutantes foram capazes de ativar esta proteína em nível semelhante ao do receptor selvagem. Com base nesses resultados, acreditamos que os resíduos de Pro POT. 82 e Pro POT. 207 estejam diretamente envolvidos no processo de ativação da via clássica desencadeada mediante a ativação do receptor AT IND. 1. Além disso, nossos resultados forneceram mais evidências de que os requerimentos estruturais do receptor AT IND. 1 não são os mesmos quanto às diferentes vias de sinalização desencadeadas por este receptor quando estimulado com a Angiotensina II, evidenciados aqui através da comparação de resultados obtidos nos ensaios funcionais de acidificação extracelular e mobilização de cálcio intracelular com aqueles obtidos na ativação de ERK
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2007
- Data da defesa: 21.09.2007
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ABNT
REIS, Rosana Inácio dos. Avaliação da transdução de sinal no receptor 'AT IND. 1' de angiotensina II através de mutações sítio-dirigidas. 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007. . Acesso em: 03 out. 2024. -
APA
Reis, R. I. dos. (2007). Avaliação da transdução de sinal no receptor 'AT IND. 1' de angiotensina II através de mutações sítio-dirigidas (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Reis RI dos. Avaliação da transdução de sinal no receptor 'AT IND. 1' de angiotensina II através de mutações sítio-dirigidas. 2007 ;[citado 2024 out. 03 ] -
Vancouver
Reis RI dos. Avaliação da transdução de sinal no receptor 'AT IND. 1' de angiotensina II através de mutações sítio-dirigidas. 2007 ;[citado 2024 out. 03 ]
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