VP1 de vírus coxsackie B5: clonagem, expressão e efeito imunoprotetor em camundongos C3H/HeJ (2007)
- Authors:
- Autor USP: BONCRISTIANI JÚNIOR, HUMBERTO FREIRE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: ENTEROVÍRUS; PICORNAVIRIDAE; EXPRESSÃO GÊNICA; IMUNOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Os enterovírus são vírus pertencentes a família picornaviridae, frequentemente associados com infecções humanas importantes em saúde pública, tais como meningite, meningoencefalite e miocardite. São vírus desprovidos de envoltório lipoprotéico, com capsídeo composto por 60 protômeros constituídos de quatro proteínas, entre elas VP1, que contém os principais sítios imunogênicos. Nós descrevemos a clonagem molecular e expressão da proteína VP1 do enterovírus Coxsackie B5 (CVB5) em E.colí e o seu papel protetor contra infecção experimental em camundongos C3H/Hej. A região do RNA viral que codifica VP1 foi amplificada por RT-PCR, os amplicons clonados no vetor pENTR 221 e sub-clonados nos vetores pDEST-14 (para expressão de VP1 sozinha) e pDEST-15 (para expressão de VP1 com cauda de GST), ambos do sistema Gateway. Outro clone foi preparado no vetor pGEMT easy e sub-clonado no plasmídeo pGEX-4T-1 (GE-Healthcare) para expressão em E.colí. Os vetores que expressam proteínas de fusão ,resultaram em expressão de maior quantidade de proteína recombinante. A proteína VP1 recombinante foi usada para imunizar camundongos machos da linhagem C3H/HeJ, que desenvolvem pancreatite aparentemente assintomática após infecção experimental com 250 ID'IND.50' de CVB5. A proteção foi avaliada nos dias três e cinco após a infecção, e foi observada redução significante nos títulos de vírus no pâncreas, bem como nas lesões histológicas nos animais imunizados em comparação com os controles. Esteé o primeiro relato de uma proteína com efeito protetor contra doença experimentalmente induzida contra CVB5
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2007
- Data da defesa: 12.06.2007
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ABNT
BONCRISTIANI JUNIOR, Humberto Freire. VP1 de vírus coxsackie B5: clonagem, expressão e efeito imunoprotetor em camundongos C3H/HeJ. 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007. . Acesso em: 02 out. 2024. -
APA
Boncristiani Junior, H. F. (2007). VP1 de vírus coxsackie B5: clonagem, expressão e efeito imunoprotetor em camundongos C3H/HeJ (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Boncristiani Junior HF. VP1 de vírus coxsackie B5: clonagem, expressão e efeito imunoprotetor em camundongos C3H/HeJ. 2007 ;[citado 2024 out. 02 ] -
Vancouver
Boncristiani Junior HF. VP1 de vírus coxsackie B5: clonagem, expressão e efeito imunoprotetor em camundongos C3H/HeJ. 2007 ;[citado 2024 out. 02 ]
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