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Isolamento e identificação de transcrito gênicos envolvidos na resposta e resistência de Trichophyton rubrum aos antifúngicos fluconazol, anfotericina B e nistatina (2007)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: PAIÃO, FERNANDA GONZALES - FMRP
  • Unidades: FMRP
  • Sigla do Departamento: RGE
  • Subjects: FUNGOS; ANTIFÚNGICOS (RESISTÊNCIA); GENÉTICA MICROBIANA
  • Language: Português
  • Abstract: O entendimento dos mecanismos moleculares de resistência a antimicóticos pode ser de grande auxílio para o desenvolvimento de novos antifúngicos, através da descoberta de novos alvos e também para o refinamento e melhor administração de drogas já empregadas no tratamento de Trichophyton rubrum e de outros fungos patogênicos. Diante disso, o presente trabalho propõe o isolamento e a identificação de transcritos gênicos envolvidos na resposta e nos mecanismos moleculares de resistência de T. rubrum aos antifúgicos fluconazol, anfotericina B e nistatina. Com essa finalidade, foram realizados experimentos de expressão gênica diferencial (Differentia/ Disp/ay e Hibridação Subtrativa Supressiva) envolvendo a linhagem H6 (selvagem) exposta e não exposta aos antifúngicos acima mencionados e também linhagens mutantes F6 (resistente ao fluconazol) e N1 (resistente a nistatina). Dentre os genes responsivos ao fluconazol, que tiveram sua expressão validada por Northern B/ot estão transcritos similares a genes que codificam as seguintes proteínas: NIMA interactive protein (TINA) envolvida na divisão celular; Copper resistance-associated P-type ATPase, responsável pela homeostase celular do cobre; Carboxylic ester hydrolase, relacionada ao metabolismo de lipídios e uma DEAD helicase, envolvida na transcrição. Dentre os genes relacionados com o mecanismo de resistência ao fluconazol estão genes que codificam proteínas similares a três proteínas da via proteassomo-ubiquitina (Translationinitiation factor 3, proteasome subunit 3 e transcriptional factor C2H2); outras três relacionadas ao metabolismo de lipídios (lysophosphlipase, Phosphatidylethanolamine methyltransferase e Related to ethanolaminephosphotransferase); duas proteínas da via de decaimento de RNA (eukariotic peptide chain release e regulator of nonsense transcripts) e uma proteína relacionada à biogênese celular. Um número significativo de genes responsivos aos polienos codifica proteínas relacionadas à resposta ao estresse causado por danos à membrana celular. Entre eles estão os genes que codificam enzimas similares a diferentes HSPs (Heat shock proteins), como o transcrito similar a proteína HSP90, que apresentou alta expressão na presença de nistatina e genes relacionados ao transporte celular similar ao gene que codifica uma H+-ATPase que teve sua expressão confirmada por Northern Blot em resposta a anfotericina B e a nistatina. A clusterização destes genes foi fundamental para revelar possíveis mecanismos de resistência de T. rubrum ao fluconazol e, aos polienos anfotericina B e nistatina. Também foi realizado o mapeamento físico de dois genes (provenientes dos experimentos de expressão gênica) de T. rubrum usando eletroforese em campo pulsado (CHEF). Estes resultados demonstram que a atuação de genes de diferentes vias de T. rubrum é necessária para uma resposta adequada aos antifúngicos testados, revelando possíveis alvos celulares para o desenvolvimento denovas classes de antifúngicos
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 02.05.2007

  • How to cite
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    • ABNT

      PAIÃO, Fernanda Gonzales; MARTINEZ-ROSSI, Nilce Maria. Isolamento e identificação de transcrito gênicos envolvidos na resposta e resistência de Trichophyton rubrum aos antifúngicos fluconazol, anfotericina B e nistatina. 2007.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007.
    • APA

      Paião, F. G., & Martinez-Rossi, N. M. (2007). Isolamento e identificação de transcrito gênicos envolvidos na resposta e resistência de Trichophyton rubrum aos antifúngicos fluconazol, anfotericina B e nistatina. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Paião FG, Martinez-Rossi NM. Isolamento e identificação de transcrito gênicos envolvidos na resposta e resistência de Trichophyton rubrum aos antifúngicos fluconazol, anfotericina B e nistatina. 2007 ;
    • Vancouver

      Paião FG, Martinez-Rossi NM. Isolamento e identificação de transcrito gênicos envolvidos na resposta e resistência de Trichophyton rubrum aos antifúngicos fluconazol, anfotericina B e nistatina. 2007 ;

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