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Expressão gênica em oócitos bovinos associada à competência de desenvolvimento embrionário (2007)

  • Authors:
  • Autor USP: BIASE, FERNANDO HENRIQUE - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RGE
  • Subjects: OÓCITOS; EMBRIÃO; BLASTOCISTO; BOVINOS; EXPRESSÃO GÊNICA
  • Language: Português
  • Abstract: Oócitos possuem RNAm e proteínas necessárias ao primeiro estágio do desenvolvimento embrionário, sendo que qualidade e quantidade de transcritos podem estar associadas ao potencial do oócito em desenvolver um embrião. Com base na hipótese geral que oócitos com diferentes potenciais de desenvolvimento embrionário possuem expressão gênica diferencial, os objetivos desse trabalho foram: (1) analisar comparativamente a quantidade de RNAm global em oócitos com alto e baixo potencial de desenvolvimento antes da maturação in vitro (MIV), após a MIV e durante o desenvolvimento embrionário; (2) identificar genes com expressão limitada a oócitos, caracterizar a expressão em tecidos bovinos e comparar a abundância desses transcritos nos oócitos com alto e baixo potencial de desenvolvimento, bem como durante o desenvolvimento embrionário; (3) desenvolver um modelo retrospectivo de estudo que permita usar a informação do oócito nas análises de associação de elementos citoplasmáticos com seu potencial de desenvolvimento e, utilizando esse modelo retrospectivo, comparar a quantidade de RNAm entre oócitos que se desenvolvem e não se i desenvolvem a blastocisto; (4) caracterizar funcionalmente os genes expressos em oócitos bovinos após a MIV. Os resultados mostraram que a classificação morfológica de COCs pode separar oócitos com alto e baixo potencial de desenvolvimento antes da MIV. Os oócitos com I alto potencial de desenvolvimento possuem, em geral, maior quantidade deRNAm quando compados aos oócitos de baixo potencial de desenvolvimento. Comparado com o oócito não maturado, após a MIV a quantidade de RNAm foi reduzida a 0,69 x, diminuindo para 0,1 x em 2 células. Um aumento de ~4 x foi observado em embriões de 4 células, quando comparados embriões de 2 células. Uma nova redução na quantidade de RNAm foi evidenciada em 8 células e blastocistos, com novo aumento nos blastocistos eclodidos (~9 x). Oito genes foram identificados como provavelmente expressos exclusivamente em oócitos. Dois foram escolhidos para validação experimental em oócitos, embriões e tecidos somáticos e gonadais, sendo observada a expressão do gene Pabpnl1 apenas em oócitos e o gene Mbd312 apenas em embriões nos estágios de 4, 8 células e mórula. Oócitos com alta competência de desenvolvimento apresentaram maior quantidade de transcritos dos genes Pabpnl1 (1,7 x) e Gapdh (1,38 x), e oócitos de baixa competência de desenvolvimento não apresentaram , transcritos do gene Pabpnl1 após a MIV. Um modelo retrospectivo de estudo da capacidade do oócito se desenvolver a blastocisto foi desenvolvido e validado.Entre os oócitos com alto potencial de desenvolvimento, após a MIV, não encontramos diferença de quantidade de RNAm entre aqueles que se desenvolveram, quando comparados aos que tiveram desenvolvimento bloqueado.O modelo pennitiu ainda realizar análise funcional em larga escala dos genes expressos nos oócitos com alto potencial dedesenvolvimento,com identificação de 9553 transcritos diferentes. De fonna geral,as proteínas da maioria dos genes transcritos foram relacionadas a processos fisiológicos celulares ou metabólicos, com função de ligantes de outras proteínas ou ácidos nucléicos, no interior da célula.
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 12.04.2007

  • How to cite
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    • ABNT

      BIASE, Fernando Henrique; MARTELLI, Lúcia. Expressão gênica em oócitos bovinos associada à competência de desenvolvimento embrionário. 2007.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007.
    • APA

      Biase, F. H., & Martelli, L. (2007). Expressão gênica em oócitos bovinos associada à competência de desenvolvimento embrionário. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Biase FH, Martelli L. Expressão gênica em oócitos bovinos associada à competência de desenvolvimento embrionário. 2007 ;
    • Vancouver

      Biase FH, Martelli L. Expressão gênica em oócitos bovinos associada à competência de desenvolvimento embrionário. 2007 ;

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