Caracterização cinética da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) (2007)
- Authors:
- Autor USP: GONÇALVES, RUBIA REGINA - FFCLRP
- Unidade: FFCLRP
- Sigla do Departamento: 593
- Subjects: DECAPODA; CRUSTÁCEOS; ENZIMOLOGIA; MACROMOLÉCULA (QUÍMICA)
- Language: Português
- Abstract: A (Na POT. +,K POT. +)-ATPase presente no tecido branquial dos crustáceos osmorreguladores é um para o sistema de regulação iônica e osmótica e de excreção ativa de NH IND. 4 POT. +. Dessa forma, a caracterização cinética da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase branquial de vittatus (C. vittatus), pode fornecer dados importantes para a compreensão dos bioquímicos desses processos. Nesse sentido, foram realizados ensaios com a fração microsomal obtida do tecido branquial de C. vittatus. Os dados revelaram a presença de um único pico com atividade ATPase, com uma subunidade alfa de peso molecular de 105 kDa. Os dados obtidos a partir do substrato ATP a presença de dois sítios, um de alta com interação sítio-sítio (n IND. H=1,9; K IND. 0,5= 63,8 ± 2,9 nM e V= 19,1 ± 0,8 U/mg) e outro de baixa afinidade obedecendo a cinética Michaeliana (n IND. H=1,0; K IND. M= 44,1 n IND. H 2,6 müM e V IND. M= 123,5 ± 6,1 U/mg). Além disso, uma do tipo sítio-sítio (n IND. H= 1,8) foi observada para estimulação dos íons magnésio (V=132,0 ± 5,3 U/mg e K IND. 0,5= 0,36 ± 0,02 nM). Por outro lado, as interações dos íons (K IND. 0,5= 7,4 ± 0,4 mM), potássio (K IND. 0,5= 1,51 ± 0,05 mM) e amônio (K IND. 0,5= 4,5 ± 0,2 mM) obedeceram uma cinética Michaeliana. Os dados obtidos mostraram que em saturantes de íons potássio, a atividade enzimática aumenta na presença de íons de maneira concentração-dependente (V= 290,8 ± 14,4 U/mg e K IND. M= 2,9 ± 0,1 mM). Apresença da ouabaína no meio reacional induziu 66% de inibição (K1= 117,3 ± 3,5 indicando a presença residual de outras ATPases. A atividade K POT. +-fosfatase, medida utilização do substrato sintético PNFF (V= 47,4 ± 1,9 U/mg e K IND. M= 1,0 ± 0,04 mM), indicou um único sítio de hidrólise com característica Michaeliana (N IND. H= 1,1). Entretanto, para os íons Mg POT. 2+ (N IND. H= 2,6 e K IND. 0,5= 0,6 ± 0,1 mM), K POT. + (N IND. H= 1.4 ) e K IND. 0,5= 3,7 ± 0,1 mM) e NH IND. 4 POT. + (N IND. H= 1,9 e K IND. 0,5= 19,3 ± 0,7 mM) foi observada uma interação do tipo sítio-sítio. Em conjunto, esses dados fornecem parâmetros cinéticos importantes da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase branquial de C. vittatus, reforçando a importância da estiniulação sinérgicapelos íons K POT. + e NH IND. 4 POT. +, a qual parece contribuir com o eficiente mecanismo adaptativo desencadeado em resposta à exposição a altas concentrações externas de amônia. É importante ressaltar que o presente trabalho é o primeiro estudo que realizou a caracterização cinética da enzima (Na POT. +,K POT. +)-ATPase no ermitão C. vittatus, o qual está inserido em um microambiente constituído pela concha. Finalmente, este trabalho agrega informações relevantes relacionadas ao grupo dos Decapoda, fornecendo dados essenciais sobre o papel da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase nos processos metabólicos e de osmorregulação nos crustáceos
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2007
- Data da defesa: 23.03.2007
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ABNT
SIVIERI, Rubia Regina Gonçalves. Caracterização cinética da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda). 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/. Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Sivieri, R. R. G. (2007). Caracterização cinética da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/ -
NLM
Sivieri RRG. Caracterização cinética da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) [Internet]. 2007 ;[citado 2024 mar. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/ -
Vancouver
Sivieri RRG. Caracterização cinética da (Na POT. +,K POT. +)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) [Internet]. 2007 ;[citado 2024 mar. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/
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