Paracoccina: detecção em leveduras, micélio e formas de transição de paracoccidioides brasiliensis (2007)
- Authors:
- Autor USP: MARIANO, VÂNIA SAMMARTINO - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS; IMUNIDADE; IMUNOQUÍMICA
- Language: Português
- Abstract: Paracoccidioides brasilienis (Pb), agente causador da paracoccidioidomicose (pcm), é um fungo dimórfico termo-dependente. A forma miceliana, encontrada na natureza (26°C), é produtora de conídios, que podem ser inalados e converterem-se em leveduras à temperatura corporal (36°C), causando a doença. Embora lectinas sejam secretadas por muitos fungos, seu papel ainda não é bem estabelecido, assim como o da lectina paracoccina, secretada pelo Pb. Portanto, o presente estudo teve por objetivos caracterizar a expressão de paracoccina em rufas, formas de transição micélio-Ievedura (fML) e leveduras, bem como avaliar a expressão da lectina após exposição à anfotericina B. Anticorpos anti-paracoccina utilizados em ensaio de Westem blot (WB) foram capazes de reconhecer a paracoccina em fomas miceliana e de transição micélio-levedura (TML, micélio transferido para cultura em 36°C). Em hifas, a detecção de paracoccina foi aparentemente semelhante nos diversos tempos de cultivo avaliados. Em formas de TML, a expressão máxima de paracoccina foi nas primeiras 24 horas, com decréscimo progressivo até 72 horas e posterior estabilização. O uso dos mesmos anticorpos foi capaz de localizar a paracoccina de maneira . pontuada e superficial em hifas cultivadas por 7 dias a 26°C, por microscopia confocal de fluorescência. A imunolocalização de paracoccina nas formas de TML foi visualizada nas extremidades de hifas (a 36°C), bem como em clamidósporos. A imunolocalização deparacoccina, por microscopia confocal de fluorescência, em : leveduras cul,tivadas por 4 dias a 36°C foi predominantemente intracelular, com i disposição sugestiva de direcionamento para regiões de brotos. A expressão de paracoccina por leveduras cultivadas por tempo diferente foi mais bem estudada por citometria de fluxo. Leveduras não permeabilizadas por metanol apresentaram expressão crescente de paracoccina com o decorrer do tempo de cultivo, enquanto a permeabilização com metanol não alterou a expressão desta protema. A paracoccina também foi detectada em hifas e leveduras expostas a anfotericina B (AmB) por 7 dias. Rifas cultivadas com AmB não negativaram a expressão da proteína; apresentaram, ainda, alta freqüência de clamidósporos marcados para paracoccina, sendo que a localização de tallectina parece ter predominância interna. Leveduras expostas à mesma droga também mantiveram marcação para paracoccina, com predomínio da localização intracelular sobre a superficial. Nossos resultados sugerem que paracoccina exerça um importante papel na biologia de P. brasiliensis. A presença de paracoccina nas extremidades de hifas cultivadas a 36°C bem como em clamidósporos originados da incubação de micélio a 36°C sugerem participação da lectina no crescimento fúngico. Já a marcação de paracoccina em formas fúngicas expostas a AmB e o grande número de clamidósporos formados sugerem que a proteína possa ter papel na resistência dofungo a condições adversas. Entretanto investigação mais detalhada da expressão e de secreção de paracoccina, através do uso de marcadores específicos, poderá proporcionar novos subsídios para a melhor compreensão do papel dessa lectina na biologia de Paracoccidioides brasiliensis
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2007
- Data da defesa: 07.02.2007
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ABNT
MARIANO, Vânia Sammartino. Paracoccina: detecção em leveduras, micélio e formas de transição de paracoccidioides brasiliensis. 2007. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007. . Acesso em: 17 out. 2024. -
APA
Mariano, V. S. (2007). Paracoccina: detecção em leveduras, micélio e formas de transição de paracoccidioides brasiliensis (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Mariano VS. Paracoccina: detecção em leveduras, micélio e formas de transição de paracoccidioides brasiliensis. 2007 ;[citado 2024 out. 17 ] -
Vancouver
Mariano VS. Paracoccina: detecção em leveduras, micélio e formas de transição de paracoccidioides brasiliensis. 2007 ;[citado 2024 out. 17 ]
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