Caracterização do gene do fator transcricional 3 da RNA polimerase B(btf3) de Trichoderma reesei e efeito de seu nocaute sobre a expressão gênica no estresse por choque térmico (2007)
- Authors:
- Autor USP: TEJADA, ERIK CENDEL SAENZ - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: BIOLOGIA MOLECULAR; EXPRESSÃO GÊNICA; TRICHODERMA (CARACTERÍSTICAS)
- Language: Português
- Abstract: A transcrição pela RNA polimerase 11 (RNA polimerase B) e a sínteses de proteínas são os mais importantes processos metabólicos em células eucarióticas, e estão envolvidas no controle da expressão gênica. Trichoderma reesei foi utilizado como modelo de estudo para o desenvolvimento deste estudo. Este fungo filamentoso é um microrganismo que vem sendo utilizado por vários laboratórios no mundo para o estudo dos diversos processos biológicos básicos devido à sua grande importância biotecnológica. Foi estabelecido por nosso grupo de pesquisa um banco de dados ESTs ('Expressed Sequence Tags') para este microrganismo e, por meio da técnica de "microarrays" de cDNAs, determinou-se a reposta transcricional de T. reesei em função da disponibilidade de oxigênio e glicose, assim como a alguns estresses ambientais. Com base nesses resultados foram escolhidos alguns transcritos afetados pela limitação de oxigênio, tais como o gene btj3. Este gene codifica para a proteína reguladora BTF3 (Fator Transcricional 3 da RNA polimerase B), muito conservada em eucariotos, envolvida na transcrição de vários promotores da classe 11 e que faz parte do complexo que se liga aos polipeptídios nascentes (NAC). Com o intuito de estudar a funcionalidade do gene btj3 em condições normais e em choque térmico foi realizada uma análise transcricional comparativa em larga escala da cepa selvagem de T. reesei QM9414 e do mutante nocaute do gene btj3. A expressão de aproximadamente 2.000genes foi analisada, por meio de "microarrays", em células submetidas ao estresse por choque térmico produzido pelo incremento da temperatura de cultura a 40 'GRAUS CENTÍGRADOS'. O nocaute do gene btf3 produziu o incremento da expressão dos genes das vias metabólicas primárias (ND4 e FBA), da defesa celular (DnaJ, HSP70 e RCI) e da síntese de proteínas (eIF2); enquanto que reprimiu genes da estrutura celular (HFBII) e da síntese de RNA (ATF21). ) No choque térmico, genes que codificam para proteínas associadas com a defesa celular, como as chaperonas Hsp70 e DnaJ, tiveram sua expressão induzida enquanto que proteínas associadas à divisão celular, como histonas e septina B, e à síntese de proteínas, como as proteínas ribossomais, foram reprimidas em ambas as cepas como resultado do estresse. Os resultados obtidos na análise por "microarray" foram validados através de PCR quantitativo em tempo real (qPCR). Estes resultados sugerem que BTF3 possa atuar como repressor de alguns genes transcritos pela RNA polimerase II
- Imprenta:
- Data da defesa: 16.01.2007
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ABNT
SAENZ TEJADA, Erik Cendel. Caracterização do gene do fator transcricional 3 da RNA polimerase B(btf3) de Trichoderma reesei e efeito de seu nocaute sobre a expressão gênica no estresse por choque térmico. 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2007. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-23102007-142152/. Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Saenz Tejada, E. C. (2007). Caracterização do gene do fator transcricional 3 da RNA polimerase B(btf3) de Trichoderma reesei e efeito de seu nocaute sobre a expressão gênica no estresse por choque térmico (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-23102007-142152/ -
NLM
Saenz Tejada EC. Caracterização do gene do fator transcricional 3 da RNA polimerase B(btf3) de Trichoderma reesei e efeito de seu nocaute sobre a expressão gênica no estresse por choque térmico [Internet]. 2007 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-23102007-142152/ -
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Saenz Tejada EC. Caracterização do gene do fator transcricional 3 da RNA polimerase B(btf3) de Trichoderma reesei e efeito de seu nocaute sobre a expressão gênica no estresse por choque térmico [Internet]. 2007 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-23102007-142152/
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