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Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa (2007)

  • Authors:
  • Autor USP: CARUSO, CELIA SULZBACHER - IQSC
  • Unidade: IQSC
  • Assunto: CLOROSE VARIEGADA DOS CITROS
  • Language: Português
  • Abstract: A bactéria Xylella fastidiosa (X. fastidiosa) é um patógeno de planta que causa a clorose variegada dos citros, também conhecida como amarelinho. Xylella fastidiosa é uma bactéria limitada ao xilema, sendo transmitida de planta a planta através de insetos vetores. Através da determinação experimental da seqüência primária de algumas proteínas marcadamente expressas pela X. fastidiosa e a comparação destas com seqüências de ácidos nucléicos do genoma identificou entre elas três ORFs codificadoras de proteínas que podem estar relacionadas à patogenicidade desta bactéria no seu hospedeiro. No entanto, a função biológica destas proteínas ainda não foi funcionalmente caracterizada. Para investigar o papel biológico e realizar estudos de estrutura e função, as ORFs correspondentes as proteínas hidroxinitrila liase, corismato sintase e proteína D do sistema de transporte e secreção Tat foram clonadas, seqüenciadas e expressas em Escherichia coli. As proteínas recombinantes expressas foram purificadas por cromatografia de afinidade e suas identidades verificadas por seqüenciamento. As proteínas purificadas foram encontradas como uma única banda em SDS-PAGE. As proteínas recombinantes, pela primeira vez isoladas, foram caracterizadas em termos de estabilidade conformacional e comportamento estrutural frente a mudanças de pH e temperatura utilizando-se as espectroscopias de dicroísmo circular e fluorescência. O sucesso na construção do gene sintético e na clonagemem vetores de expressão de E. coli resultou em quantidade satisfatória de expressão das proteínas recombinantes. Duas delas apresentaram-se na formas solúveis, facilmente purificadas e ativas e permitindo suas caracterizações
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 23.03.2007
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      CARUSO, Célia Sulzbacher; CARRILHO, Emanuel. Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa. 2007.Universidade de São Paulo, São Carlos, 2007. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/ >.
    • APA

      Caruso, C. S., & Carrilho, E. (2007). Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa. Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/
    • NLM

      Caruso CS, Carrilho E. Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa [Internet]. 2007 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/
    • Vancouver

      Caruso CS, Carrilho E. Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa [Internet]. 2007 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/


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