Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa (2007)
- Authors:
- Autor USP: CARUSO, CELIA SULZBACHER - IQSC
- Unidade: IQSC
- Assunto: CLOROSE VARIEGADA DOS CITROS
- Language: Português
- Abstract: A bactéria Xylella fastidiosa (X. fastidiosa) é um patógeno de planta que causa a clorose variegada dos citros, também conhecida como amarelinho. Xylella fastidiosa é uma bactéria limitada ao xilema, sendo transmitida de planta a planta através de insetos vetores. Através da determinação experimental da seqüência primária de algumas proteínas marcadamente expressas pela X. fastidiosa e a comparação destas com seqüências de ácidos nucléicos do genoma identificou entre elas três ORFs codificadoras de proteínas que podem estar relacionadas à patogenicidade desta bactéria no seu hospedeiro. No entanto, a função biológica destas proteínas ainda não foi funcionalmente caracterizada. Para investigar o papel biológico e realizar estudos de estrutura e função, as ORFs correspondentes as proteínas hidroxinitrila liase, corismato sintase e proteína D do sistema de transporte e secreção Tat foram clonadas, seqüenciadas e expressas em Escherichia coli. As proteínas recombinantes expressas foram purificadas por cromatografia de afinidade e suas identidades verificadas por seqüenciamento. As proteínas purificadas foram encontradas como uma única banda em SDS-PAGE. As proteínas recombinantes, pela primeira vez isoladas, foram caracterizadas em termos de estabilidade conformacional e comportamento estrutural frente a mudanças de pH e temperatura utilizando-se as espectroscopias de dicroísmo circular e fluorescência. O sucesso na construção do gene sintético e na clonagemem vetores de expressão de E. coli resultou em quantidade satisfatória de expressão das proteínas recombinantes. Duas delas apresentaram-se na formas solúveis, facilmente purificadas e ativas e permitindo suas caracterizações
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2007
- Data da defesa: 23.03.2007
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ABNT
CARUSO, Célia Sulzbacher. Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa. 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2007. Disponível em: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/. Acesso em: 27 mar. 2026. -
APA
Caruso, C. S. (2007). Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/ -
NLM
Caruso CS. Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa [Internet]. 2007 ;[citado 2026 mar. 27 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/ -
Vancouver
Caruso CS. Clonagem, expressão e caracterização de proteínas recombinantes de xylella fastidiosa [Internet]. 2007 ;[citado 2026 mar. 27 ] Available from: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75132/tde-29082007-111527/
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