Caracterização genética do mutante CASTRATI (CST) de Lycopersicon esculentum (cv MICRO-TOM). (2006)
- Authors:
- Autor USP: PERES, LAZARO EUSTAQUIO PEREIRA - ESALQ
- Unidade: ESALQ
- Subjects: TOMATE; MUTAÇÃO VEGETAL
- Language: Português
- Abstract: 1. Objetivos Os genes envolvidos no controle do florescimento em Arabidopis já estão bem caracterizados. Os genes do grupo A (APETALA1/APETALA2) agem na formação do verticilo sépala e, juntamente com os genes do grupo B (APETALA3/PISTILLATA), na formação do verticilo pétala. O verticilo estame é formado pela interação dos genes do grupo B e do grupo C (AGAMOUS), este por sua vez age independentemente na formação do verticilo carpelo. Portanto, mutações nos genes de classe B promovem a conversão de pétalas em sépalas e dos estames em carpelos. Um mutante espontâneo de classe B em L. esculetum foi encontrado e denominado castrati (cst). Em tomate, diferentemente de Arabidopsis, existem 3 genes do grupo B (PISTILLATA, APETALA3, e uma duplicação de AP3 denominada TM6). A expressão do gene TM6 está relacionado apenas com o desenvolvimento dos estames [1]. Devido ao mutante castrati apresentar a conversão dos dois verticilos postulou-se a hipótese deste apresentar uma mutação em PISTILLATA ou APETALA3. O objetivo deste trabalho é caracterizar geneticamente o mutante castrati.2. Materiais e Métodos Inicialmente realizou-se um cruzamento entre a planta mutante e a selvagem (Micro-Tom). Obteve-se sementes da geração F1, que foram plantadas. Duas plantas foram escolhidas para o teste de segregação. Assim, 178 sementes foram germinadas e analisadas. Utilizou-se o teste de 2 para avaliar o padrão de herança. O DNA genômico de plantas selvagens e mutantes foi extraídosegundo o protocolo de Fulton et. al. [2] O RNA de botão e flor de plantas mutantes e selvagens foi extraído com Trizol, seguido da síntese de cDNA. Construiu-se iniciadores capazes de amplificar todo o gene PI e AP3. Realizou-se reação de PCR para os genes AP3 e PI com as diferentes amostra de cDNA e gDNA. Os fragmentos resultantes foram clonados no vetor pEntryTOPO (invitrogen). Células de E.coli foram transformadas com estes vetores. Submeteu-se as colônias recombinantes à extração de DNA plasmidial. Confirmou-se a presença do inserto por PCR e os plasmídeos contendo foram submetidos ao seqüenciamento automático. As seqüências obtidas foram analisadas no programa BLAST (NCBI). 3. Resultados e Discussão: Utilizou-se duas plantas da geração F1 para a avaliação de segregação da herança. Todas as plantas F1 apresentaram fenótipo normal o que já indicou recessividade. Na geração F2 das 178 plantas analisadas 41 apresentaram o fenótipo mutante, o que gera um proporção próxima de 1:3, aceita pelo teste de . Os fragmentos gerados pela PCR tanto para o gene AP3 como para PI foram visualizados em gel de agarose e um tamanho compatível ao gene PISTILLATA foi observado nas duas amostras, mutante e selvagem. As seqüências obtidas foram analisadas e apresentaram homologia aos genes PI e ao AP3 de Arabidopsis. Novas seqüências serão obtidas em breve a partir do DNA plasmidial e esperase encontrar alguma alteração pontual na seqüência que interrompa a síntese protéica.
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- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo
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ABNT
CAMPANA, Felippe Buck et al. Caracterização genética do mutante CASTRATI (CST) de Lycopersicon esculentum (cv MICRO-TOM). 2006, Anais.. São Paulo: USP, 2006. . Acesso em: 02 nov. 2024. -
APA
Campana, F. B., Molfetta-Machado, J. B. de, Peres, L. E. P., & Figueira, A. V. de O. (2006). Caracterização genética do mutante CASTRATI (CST) de Lycopersicon esculentum (cv MICRO-TOM). In Ciências Biológicas e da Saúde; resumos. São Paulo: USP. -
NLM
Campana FB, Molfetta-Machado JB de, Peres LEP, Figueira AV de O. Caracterização genética do mutante CASTRATI (CST) de Lycopersicon esculentum (cv MICRO-TOM). Ciências Biológicas e da Saúde; resumos. 2006 ;[citado 2024 nov. 02 ] -
Vancouver
Campana FB, Molfetta-Machado JB de, Peres LEP, Figueira AV de O. Caracterização genética do mutante CASTRATI (CST) de Lycopersicon esculentum (cv MICRO-TOM). Ciências Biológicas e da Saúde; resumos. 2006 ;[citado 2024 nov. 02 ] - Mutantes e plantas transgênicas de tomateiro com alteração no balanço auxina-citocinina e seu impacto no desenvolvimento vegetativo e reprodutivo
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