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Citotoxicidade in vitro e biocompatibilidade in vitro de compósitos a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana (2006)

  • Authors:
  • Autor USP: AMARAL, MAURICIO BORDINI DO - BIOENG
  • Unidade: BIOENG
  • Subjects: HIDROXIAPATITA; COLÁGENO; ENGENHARIA TECIDUAL
  • Language: Português
  • Abstract: Na engenharia de tecidos os biomateriais são usados tanto para induzir a formação óssea no tecido adjacente quanto agir como matriz temporária de células e outros agentes. Compósitos biodegradáveis a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana foram preparados como arcabouços para permitir a regeneração óssea. Este estudo teve como objetivo avaliar a toxicidade celular in vitro de novos compósitos de substituição óssea e o seu comportamento biológico após implantação subcutânea no processo de remodelação e cicatrização tecidual. Foram confeccionadas mantas a base de hidroxiapatita (HA), obtida por desproteinização e calcinação do osso bovino, colágeno (Col), obtido por tratamento alcalino do tendão bovino e quitosana (Qui), extraída do gládio de lula, nas seguintes proporções: B1) HA (mistura de partículas < 0,2 mm e entre 0,2 e 1,18 mm, proporção 1:1) + Blenda (Col 1% + Qui 0,5%, proporção 1:1), proporção HA:Blenda 1:5; B2) HA (mistura de partículas < 0,2 mm e entre 0,2 e 1,18 mm, na proporção 1:1) + Col 1%, proporção HA:Col 1:5; B3) HA (partículas < 0,2 mm) + Col 1%, na proporção 1:5. O teste de citotoxicidade in vitro foi realizado pelo método de difusão de extrato em solução (brometo de tetrazolio - MTT). Os biomateriais descritos acima foram avaliados juntamente com o controle positivo (látex), sendo que todos foram submetidos a procedimentos de extração de acordo as normas da ISO 10993-5. O meio de cultura foi utilizado como controle negativo. Foram utilizadas duaslinhagens celulares: células tumorais de laringe humana HEp (ATCC-CCL-23) e células normais de rim de macaco verde africano (Cercopithecus aethiops) VERO (n=3). A citotoxicidade foi avaliada em um espectrofotômetro (absorbância de 570 nm). No teste de biocompatibilidade as amostras foram implantadas no subcutâneo da região dorsal de 45 ratos Wistar. Histomorfometria de espessura e qualidade da cápsula fibrosa, interface implante-tecido, ) infiltrado inflamatório e crescimento celular interno foram realizados aos 3, 7 e 28 dias após cirurgia (n=5). Imunohistoquímica foi realizada para caracterizações adicionais do infiltrado de macrófagos. No teste de citotoxicidade as linhagens celulares mostraram resultados semelhantes. Não houve diferença entre os compósitos e o controle negativo. Foi demonstrado que os compósitos avaliados não apresentaram efeitos tóxicos em comparação ao controle positivo. No teste subcutâneo a qualidade e a espessura da cápsula não apresentaram diferenças significantes entre os biomateriais e os períodos de implantação. A resposta celular inflamatória aos 7 dias foi mais intensa no biomaterial B1, seguido pelo biomaterial B2 e B3. Uma baixa reação de corpo estranho foi observada em todos os biomateriais, caracterizada pela presença de poucos macrófagos. Ocorreu um intenso crescimento celular no interior do biomaterial B3 aos 28 dias. A análise histológica sugere que esses biomateriais são bem tolerados com baixa reação tecidualinflamatória. Concluímos que os três biomateriais avaliados não apresentaram evidências de citotoxicidade in vitro e, in vivo, mostraram uma boa biocompatibilidade. Esses materiais mostraram-se bons candidatos a matrizes para engenharia de tecidos e enxertos para regeneração óssea
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 19.10.2006
  • Acesso à fonte
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    • ABNT

      AMARAL, Mauricio Bordini do. Citotoxicidade in vitro e biocompatibilidade in vitro de compósitos a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana. 2006. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2006. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/82/82131/tde-30072007-163145/. Acesso em: 18 nov. 2024.
    • APA

      Amaral, M. B. do. (2006). Citotoxicidade in vitro e biocompatibilidade in vitro de compósitos a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/82/82131/tde-30072007-163145/
    • NLM

      Amaral MB do. Citotoxicidade in vitro e biocompatibilidade in vitro de compósitos a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana [Internet]. 2006 ;[citado 2024 nov. 18 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/82/82131/tde-30072007-163145/
    • Vancouver

      Amaral MB do. Citotoxicidade in vitro e biocompatibilidade in vitro de compósitos a base de hidroxiapatita, colágeno e quitosana [Internet]. 2006 ;[citado 2024 nov. 18 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/82/82131/tde-30072007-163145/


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