Expressão de conexinas na retina de ratos (2006)
- Authors:
- USP affiliated authors: BRITTO, DANIA EMI HAMASSAKI - ICB ; BRITTO, LUIZ ROBERTO GIORGETTI DE - ICB
- Unidade: ICB
- Subjects: HISTOLOGIA; FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Os canais formados pelas conexinas (Cxs) nas junções comunicantes (JC) permitem a passagem de íons e moléculas de até 1 kDa. O papel da comunicação celular provida por estes canais no desenvolvimento neural tem sido intensamente investigado. Na retina adulta os canais de JC possuem papel importante na codificação da informação visual e manutenção da homeostase. Entretanto, a identidade molecular e protéica das Cxs que formam os canais de JC na retina ainda é pouco conhecida. Nosso objetivo é determinar a expressão de Cxs na retina de ratos.Utilizamos diferentes metodologias para determinar a expressão de Cxs na retina de ratos. 1) Quantificação da expressão gênica por PCR em tempo real. A extração de RNA foi realizada pelo método do TRIzol, seguido de transcrição reversa. A quantificação da expressão gênica foi realizada pelo sistema SYBR Green. 2) Caracterização da expressão protéica por imuno-histoquímica. Os olhos foram pós-fixados em PFA 1-2% ou em etanol absoluto. Os cortes foram incubados com anticorpos primários contra GFAP (marcador para astrócitos), Cx36, Cx43, Cx45 e Cx57 e secundários conjugados com fluoresceína isotiocianato (FITC) ou tetrametil isotiocianato de rodamina (TRITC), possibilitando a análise em microscopia confocal. Os experimentos de PCR determinaram diferentes níveis de transcritos para cada Cx, sugerindo um controle específico da expressão gênica de Cxs na retina. A distribuição protéica também seguiu um padrão específico para cada Cx.Uma intensa imuno-reatividade (IR) para Cx36 foi observada na sub-lâmina ON da camada plexiforme interna (IPL), além de uma moderada marcação na sub-lâmina OFF e na camada plexiforme externa (OPL). A IR-Cx43 foi observada na camada de células ganglionares (GCL) em co-localização com GFAP. Por sua vez, a IR-Cx45 foi observada igualmente na OPL e IPL. Finalmente, a IR-Cx57 foi observada na OPL. ) Nossos resultados indicam uma expressão gênica e distribuição protéica específica para cada Cx, sugerindo papéis distintos para o acoplamento celular provido por estas na fisiologia e manutenção da homeostase retiniana.
- Imprenta:
- Publisher: Federação de Sociedades de Biologia Experimental
- Publisher place: Águas de Lindóia
- Date published: 2006
- Source:
- Título do periódico: Programa e resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FESBE
-
ABNT
SANTOS, T. O. et al. Expressão de conexinas na retina de ratos. 2006, Anais.. Águas de Lindóia: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2006. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Santos, T. O., Kihara, A. H., Castro, L. M., Hamassaki, D. E., & Britto, L. R. G. de. (2006). Expressão de conexinas na retina de ratos. In Programa e resumos. Águas de Lindóia: Federação de Sociedades de Biologia Experimental. -
NLM
Santos TO, Kihara AH, Castro LM, Hamassaki DE, Britto LRG de. Expressão de conexinas na retina de ratos. Programa e resumos. 2006 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Santos TO, Kihara AH, Castro LM, Hamassaki DE, Britto LRG de. Expressão de conexinas na retina de ratos. Programa e resumos. 2006 ;[citado 2024 abr. 19 ] - Nicotinic acetylcholine receptors in the ground squirrel retina: localization of the beta 4 subunit by immunohistochemistry and in situ hybridization
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