Bloqueio da fosforilação oxidativa no cultivo de embriões bovinos (2006)
- Authors:
- Autor USP: MESQUITA, LÍGIA GARCIA - FZEA
- Unidade: FZEA
- Sigla do Departamento: ZAB
- Subjects: EMBRIÃO DE ANIMAL; BOVINOS; CÉLULAS MORTAS; MITOCÔNDRIAS; BLASTOCISTO
- Language: Português
- Abstract: Apesar da melhoria no sistema de produção e cultivo dos embriões in vitro, cerca de 60% dos oócitos que entram no sistema, não atingem o estágio de blastocisto e a qualidade dos embriões obtidos é bastante variável quando comparadas com embriões produzidos in vivo. Este bloqueio pode ser afetado por íons inorgânicos, tampões, aminoácidos e composição da atmosfera gasosa. Partindo-se da premissa que há influência da mitocõndria sobre a ativação da morte celular programada levou-nos a formular a hipótese que ausência de fragmentação nuclear nos embriões antes das 72 hpi está relacionada com a ausência do potencial de membrana mitocondrial e a inibição da OXPHOS pela utilização de bloqueadores leva a manutenção de baixos níveis de potencial de membrana mitocondrial e baixas taxas de fragmentação nuclear nos embriões. Embriões foram produzidos in vitro mediante maturação durante 22 horas, fecundação e cultivo 18 horas após a inseminação (hpi). Decorridas 24hpi realizou-se o cultivo com 0% de oxigênio, a fim de bloquear o processo de OXPHOS. Após 48 hpi realizou-se o feeding do meio de cultivo (SOF) com inibidores da OXPHOS (antimicina A e/ou oligomicina, cianeto de potássio) em diferentes doses. O número de embriões 8 células foi determinado às 80 hpi, mesmo momento em que foram realizadas as técnicas de JC-1 e TUNEL. Verificou-se as 168 hpi o efeito dos tratamentos no desenvolvimento embrionário. Os resultados obtidos com a inibição da OXPHOS após 48 hpi com oligomicina e/ouantimicina A nas doses utilizadas não alterou a capacidade do embrião atingir o estádio de 8 células. Entretanto, esta inibição inviabilizou o desenvolvimento até o estádio de blastocisto. O tratamento com KCN permitiu o desenvolvimento até o estádio de 8 células e a blastocisto em taxas semelhantes ao controle. A inibição do cultivo na ausência do O2 inviabilizou o processo de cultivo. Já os resultados obtidos quanto ao 'psi'mm e TUNEL ) evidenciam que os tratamentos dos embriões antimicina e/ou oligomicina levaram a um aumento do 'psi'mm e fragmentação nuclear na maioria dos embriões testados. Portanto, não foi possível testar a hipótese de que o 'psi'mm é necessário para o estabelecimento da MCP, todavia, foi observada uma correlação positiva entre 'psi'mm e fragmentação nuclear
- Imprenta:
- Publisher place: Pirassununga
- Date published: 2006
- Data da defesa: 19.01.2006
-
ABNT
MESQUITA, Ligia Garcia. Bloqueio da fosforilação oxidativa no cultivo de embriões bovinos. 2006. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2006. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74131/tde-11072006-150001/. Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Mesquita, L. G. (2006). Bloqueio da fosforilação oxidativa no cultivo de embriões bovinos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Pirassununga. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74131/tde-11072006-150001/ -
NLM
Mesquita LG. Bloqueio da fosforilação oxidativa no cultivo de embriões bovinos [Internet]. 2006 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74131/tde-11072006-150001/ -
Vancouver
Mesquita LG. Bloqueio da fosforilação oxidativa no cultivo de embriões bovinos [Internet]. 2006 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74131/tde-11072006-150001/ - Influência da depleção e suplementação mitocondrial no processo de apoptose embrionária
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