Construção de um vetor de amplo espectro para ancoragem de proteínas em membrana externa de bactérias gramnegativas (2005)
- Authors:
- USP affiliated authors: VICENTE, ELISABETE JOSE - ICB ; SCHENBERG, ANA CLARA GUERRINI - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: A ancoragem de peptídeos heterólogos na superfície de bactérias apresenta aplicações como a produção de vacinas, anticorpos, adsorventes e biocatalizadores. A protease da imunoglobulina A (IgA) de Neisseria gonorrhoeae é uma proteína excretada cujo carboxi-terminal (beta domínio), que é responsável pela localização na membrana externa, é clivado na etapa final de excreção. O beta domínio forma um poro na membrana externa permitindo a passagem de qualquer peptídeo a ele fusionado, que ficará portanto, ancorado na membrana externa, a condição que o sítio de clivagem seja removido. Este trabalho teve como objetivo a construção de um vetor de amplo espectro para ancoragem de peptídeos na membrana externa de bactérias Gram(-), utilizando o peptídeo sinal e o beta domínio da IgA protease de N. gonorrhoeae, fusionados ao vetor pBBR1MCS de amplo espectro. Métodos e Resultados: O plasmídeo pFvH\beta foi digerido com Xba I e Hind III, liberando um fragmento de aproximadamente 1500 pb correspondente ao peptídeo sinal fusionado a um anticorpo de cadeia simples e ao beta domínio da IgA protease de N. gonorrhoeae. O vetor pBBR1MCS (4900 pb) foi também digerido com Xba I e Hind III e ligado ao fragmento obtido de pFvH\beta. A mistura de ligação foi utilizada para transformar células competentes de Escherichia coli DH5\alpha por eletroporação. Foram obtidos transformantes portadores de um vetor de 6400 pb, que, após ser digerido com Xba I e Hind III, apresentou fragmentosde 1500 pb e 4900pb referentes ao fragmento de pFvH\beta e ao vetor pBBR1MCS, respectivamente, em gel de agarose 0,8% submetido a corrida eletroforética. Conclusão: Foi possível construir um vetor de amplo espectro que abre a possibilidade de ancorar peptídeos na membrana externa de bactérias Gram(-) para o desenvolvimento de organismos com novos potenciais biotecnológicos
- Imprenta:
- Publisher: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2005
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Congresso do Instituto de Ciências Biomédicas
-
ABNT
BIONDO, Ronaldo et al. Construção de um vetor de amplo espectro para ancoragem de proteínas em membrana externa de bactérias gramnegativas. 2005, Anais.. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP, 2005. . Acesso em: 10 jan. 2026. -
APA
Biondo, R., Silva, F. A., Quadros, O. F., Balan, A., Barco, L., Gouveia, A. N., et al. (2005). Construção de um vetor de amplo espectro para ancoragem de proteínas em membrana externa de bactérias gramnegativas. In Resumos. São Paulo: Comissão de Cultura e Extensão Universitária do ICB/USP. -
NLM
Biondo R, Silva FA, Quadros OF, Balan A, Barco L, Gouveia AN, Vicente EJ, Schenberg ACG. Construção de um vetor de amplo espectro para ancoragem de proteínas em membrana externa de bactérias gramnegativas. Resumos. 2005 ;[citado 2026 jan. 10 ] -
Vancouver
Biondo R, Silva FA, Quadros OF, Balan A, Barco L, Gouveia AN, Vicente EJ, Schenberg ACG. Construção de um vetor de amplo espectro para ancoragem de proteínas em membrana externa de bactérias gramnegativas. Resumos. 2005 ;[citado 2026 jan. 10 ] - Engenharia genetica de pichia pastoris visando a obtencao de proteina unicelular a partir de sacarose
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