Pesquisa de morbilivirus em mamíferos marinhos na Costa Brasileira por reação de polimerização em cadeia (nested RT-PCR) (2005)
- Authors:
- Autor USP: MARANHO, ANDREA - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMM
- Subjects: MICROBIOLOGIA; CETACEA; PINNIPEDIA; VIROLOGIA; LITORAL; MAMÍFEROS MARINHOS; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE
- Language: Português
- Abstract: Amostras de tecidos congelados de espécimes de 69 Dephinidae, 3 Physetedae e 40 Pontoporidae, 2 Mysticeti representados por 3 Balenopteridae e 19 pinipedes sendo 17 Otaridae e 2 Phocidae foram colhidos aleatoriamente durante eventos de encalhes e capturas acidentais na costa brasileira entre 1997 a 2004. As amostras foram analisadas por reação de polimerização em cadeia (nested e semi nested RT-PCR) para pesquisa do vírus da cinomose canina (CDV), vírus da cinomese focina (PDV) e Morbilivirus de cetáceos (CMV). As reações de amplificação foram realizadas com dois pares de primers baseados em seqüências conservadas da fosfoproteína (P) e da nucleoproteína (NP). Para CDV e PDV em pinípedes os primers utilizados foram CDV NP F1 5'-ATCCCCAGGRAACAAGCCTAGAA-3', na posição 833-855 e CDV NP R1 5'-CTTGGTGATGCCAAGCTCG-3'(anti sense), posição 1272-1253, amplificando 440 pb; o semi-nested realizado com o primer RMBV -32 5'-CCTTGGTGATGCCAAGCTCG-3' (anti sense), posição 1164-1145 amplificando fragmentos de 235 pb. No caso CMV nos cetáceos o par de primers utilizado foi D 1f 5'-ATGGCAGAGGAGCAGGCCT-3', posição 1164-1145 e D4r 5'- TCGTCACAGACTGGCGGACA-3', posição 2633-2614, amplificando 831 pb no PCR e o nested-PCR foi realizado com primers internos D 2r 5'- ACCTGCAGTACGATGTTACCATG-3', posição 2113-2135 e D3f 5'-TCTCTCCTGTGCCCTTTTTAATG-3', posição 2504-2482, amplificando 391 pb e o semi nested-PCR com primers D1f e D3r, amplificando 702 bp. Foi observado um aumento de encalhes individuais de algumas espécies como o golfinho-Clymene na Bahia e golfinho-rotador no Ceará durante os últimos 2 anos.No entanto, a presença de Morbilivirus não foi observada por nested ou semi nested-PCR nos 128 animais de encalhe individual e 6 golfinhos-de-Fraser do evento de encalhe em massa analisados. Para verificação da presença de RNA foi realizada amplificação por ß-actina nos tecidos muito autolisados disponíveis. Os resultados sugerem baixa ) circulação destes vírus nas populações de mamíferos marinhos no sudoeste do Oceano Atlântico e não correlacionou a captura acidental das espécies regionais analisadas como as populações vulneráveis de franciscana e tucuxi com infecção por Morbilivirus. Os cDNAs foram estocados para criar o Banco de Material Genético do Laboratório de Virologia Clinica e Molecular, na Universidade de São Paulo, para estudos de diagnostico retroativos. É necessário o desenvolvimento de técnicas de amostragem mais precisas para sorologia e epidemiologia e o estabelecimento e inclusão de amostragem para virologia em protocolos de atendimento de encalhes em Redes de Encalhe de Mamíferos Marinhos no Brasil
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.11.2005
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ABNT
MARANHO, Andrea. Pesquisa de morbilivirus em mamíferos marinhos na Costa Brasileira por reação de polimerização em cadeia (nested RT-PCR). 2005. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2005. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Maranho, A. (2005). Pesquisa de morbilivirus em mamíferos marinhos na Costa Brasileira por reação de polimerização em cadeia (nested RT-PCR) (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. -
NLM
Maranho A. Pesquisa de morbilivirus em mamíferos marinhos na Costa Brasileira por reação de polimerização em cadeia (nested RT-PCR). 2005 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Maranho A. Pesquisa de morbilivirus em mamíferos marinhos na Costa Brasileira por reação de polimerização em cadeia (nested RT-PCR). 2005 ;[citado 2024 abr. 23 ]
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