Expressão gênica exógena em embriões de galinha por eletroporação in ovo (2005)
- Authors:
- Autor USP: YAN, CHAO YUN IRENE - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: Otimização da técnica de eletroporação para superexpressão gênica em vesículas oculares de embriões de galinha in ovo. Material e/ou métodos: Os ovos embrionados foram incubados a 38C até o estágio inicial de fechamento do tubo neural (HH11). O vetor eletroporado, pCDNA 3.1 contendo o gene para EGFP, foi diluído numa solução de Fast Green 10% e injetado por microagulha de vidro no tubo neural do embrião. Os eletrodos de platina foram posicionados ao longo do tubo neural do embrião e variamos os seguintes parâmetros: voltagem, duração e números de pulsos. Ao final dos experimentos, foram adicionados 0,2ml de salina PBS com antibióticos e os ovos foram re-incubados por 12 horas. A expressão de GFP foi analisada no microscópio de fluorescência. Resultados: Obtivemos maior sobrevida e eficiência de eletroporação com 5 pulsos de 15 volts de 50ms a 1Hz. Também observamos que a remoção da membrana vitelínica aumentou o número de células positivas para GFP. Além disto, quando a microinjeção foi realizada pelo neuróporo em direção ao vesícula óptica, a marcação ficou concentrada na região ocular. Conclusões: A eletroporação é um método eficaz para a superexpressão gênica, tornando-o um instrumento versátil para o estudo do desenvolvimento embrionário de vertebrados. Adicionalmente, a metodologia pode ser adaptada para conferir uma especificidade espacial de forma que afete apenas a região embrionária de interesse
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2005
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo, SIICUSP
-
ABNT
SIWIEC, Fernanda e YAN, Chao Yun Irene. Expressão gênica exógena em embriões de galinha por eletroporação in ovo. 2005, Anais.. Ribeirão Preto: Universidade de São Paulo, 2005. . Acesso em: 28 maio 2025. -
APA
Siwiec, F., & Yan, C. Y. I. (2005). Expressão gênica exógena em embriões de galinha por eletroporação in ovo. In Resumos. Ribeirão Preto: Universidade de São Paulo. -
NLM
Siwiec F, Yan CYI. Expressão gênica exógena em embriões de galinha por eletroporação in ovo. Resumos. 2005 ;[citado 2025 maio 28 ] -
Vancouver
Siwiec F, Yan CYI. Expressão gênica exógena em embriões de galinha por eletroporação in ovo. Resumos. 2005 ;[citado 2025 maio 28 ] - Biologia celular de células da crista neural durante o desenvolvimento de embriões de galinha
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