Modulação funcional e genética de NHE3 por vitamina D (2005)
- Authors:
- USP affiliated authors: REBOUCAS, NANCY AMARAL - ICB ; SILVA, CIRO FERREIRA DA - ICB
- Unidade: ICB
- Subjects: FISIOLOGIA; HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: O paratormônio (PTH) e um hormônio chave na produção da forma ativa de vitamina D, pois estimula a síntese de 1_-hidroxilase, enzima que catalisa a 1_- hidroxilação da 25-hidroxivitamina D3. Tal processo ocorre fundamentalmente em túbulos proximais, local onde há abundancia da isoforma 3 do permutador Na+/H+ (NHE3), cuja atividade e inibida por ação do PTH. Existem evidencias experimentais de que a vitamina D interfira de forma aguda com os efeitos celulares do PTH, diminuindo a produção de AMPc e revertendo a ação inibitória que o mesmo exerce sobre o NHE3. O objetivo deste trabalho foi obter o cDNA completo do receptor para vitamina D (VDR) e expressar essa proteína, original e em forma de fusão com EYFP, em células de túbulos proximais de opossum (OKP). Em células OKP transfectadas e não transfectadas, avaliaremos o efeito da vitamina D sobre o promotor do gene NHE3 e sobre os níveis de expressão e atividade desse permutador. Métodos e Resultados: Foram feitos iniciadores para amplificação do segmento de VDR de rato com e sem stop códon e o produto amplificado foi inserido nos vetores pcDNA3.1 e pEYFP-N1, respectivamente. Através do sequenciamento desse vetor foi possível confirmar a adequada inserção do cDNA. Alem disso, diferentes fragmentos da região promotora de NHE3, clonados em pGL3 (Clontech), vetor contendo o gene reporter Firefly luciferase foram obtidos e a atividade dos mesmos foi avaliada em células OKP.) A maior atividade dopromotor foi observada com o segmento -152 a + 55, considerando +1, o sitio de inicio de transcrição. Esse segmento foi cerca de 10 vezes mais ativo que nosso segmento maior (-2.095 a + 55). Conclusões: Nossos resultados sobre os efeitos da vitamina D sobre o promotor do gene NHE3 ainda são bem preliminares e não conclusivos. O que conseguimos ate o momento foi a construção dos vetores de expressão do VDR. Estamos padronizando o processo de transfecção, para analise do efeito da vitamina D em células transfectadas
- Imprenta:
- Publisher: Federação de Sociedades de Biologia Experimental
- Publisher place: Águas de Lindóia, São Paulo
- Date published: 2005
- Source:
- Título: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental, FeSBE
-
ABNT
DA SILVA, Ciro Ferreira e HIRAKI, Y. e REBOUÇAS, Nancy Amaral. Modulação funcional e genética de NHE3 por vitamina D. 2005, Anais.. Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2005. . Acesso em: 09 set. 2025. -
APA
Da Silva, C. F., Hiraki, Y., & Rebouças, N. A. (2005). Modulação funcional e genética de NHE3 por vitamina D. In Resumos. Águas de Lindóia, São Paulo: Federação de Sociedades de Biologia Experimental. -
NLM
Da Silva CF, Hiraki Y, Rebouças NA. Modulação funcional e genética de NHE3 por vitamina D. Resumos. 2005 ;[citado 2025 set. 09 ] -
Vancouver
Da Silva CF, Hiraki Y, Rebouças NA. Modulação funcional e genética de NHE3 por vitamina D. Resumos. 2005 ;[citado 2025 set. 09 ] - Efeito da vitamina d sobre os níveis de cálcio intracelulares em células OKP e IEC6
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