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Desenvolvimento e avaliação da reação em cadeia de polimerase (PCR) na determinação da infecção por Leishmanias em flebotomíneos vetores (Diptera: Psychodidae) (2005)

  • Authors:
  • Autor USP: PAIVA, BYANCA REGINA DE - ICB
  • Unidade: ICB
  • Sigla do Departamento: BMP
  • Subjects: PARASITOLOGIA; VETORES; DIAGNOSTICO; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE
  • Language: Português
  • Abstract: A Leishmaniose é uma protozoose heteroxênica de alta prevalência em regiões tropicais como o Brasil, transmitida por vetores flebotomíneos. Na clínica, a doença apresenta amplo espectro devido às várias espécies causadoras de doença e diferenças na susceptibilidade individual dos hospedeiros, resultando em diversas abordagens terapêuticas e prognósticos individuais, impondo o diagnóstico espécie-especifico do agente. Apesar de pequenas diferenças em sua distribuição no tubo digestivo do vetor, este parasita assume uma forma flagelada indistinguível entre as espécies. Portanto, para estudos epidemiológicos e programas de controle, a identificação do agente etiológico no vetor é de crucial importância. A identificação de parasitas tais como Plasmodium, filarioses etc em insetos vetores, através da reação em cadeia de polimerase (PCR) tem sido de grande utilidade podendo esta técnica ser também adaptada à identificação das diversas espécies de Leishmanias. Em nossos estudos, utilizamos seqüências deduzidas a partir de regiões do mini-exon encontrada em todos os Kinetoplastida.) O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do PCR na determinação da infecção por Leishmanias em flebotomíneos capturados em zonas endêmicas, para avaliar o risco da transmissão da doença para seres humanos e/ou reservatórios. Utilizamos duas etapas, sendo a primeira, a padronização da reação de PCR utilizando parasitas de cultivo e posteriormente flebotomíneos experimentalmenteinfectados por alimentação em animal infectado ou alimentador artificial. Em uma segunda etapa deste projeto, flebotomíneos provenientes de áreas endêmicas de leishmaniose tegumentar e visceral foram utilizados para avaliar eventual positividade para a reação de PCR. Inicialmente, avaliamos e padronizamos as condições de armazenamento e extração de ácidos nucléicos, bem como a sensibilidade e especificidade de cada reação. O armazenamento dos espécimens por imersão em isopropanol ou etanol revelou-ser mais prático para trabalhos em campo e foi utilizado em nosso estudo. Nossos primers foram capazes de detectar a concentração de aproximadamente 0.15pg de DNA de Leishmania. Quanto à especificidade, os conjuntos de primers desenvolvidos foram testados com ácidos nucléicos de outros parasitas ou de flebotomíneos. A técnica de PCR padronizada foi capaz de identificar taxa mínima de infecção por Leishmania em 3,9% dos flebotomíneos capturados em campo. Determinou-se as espécies infectantes em alguns grupos, sendo dois deles identificados como L. (L.) chagasi e um grupo como L. (L.) amazonensis. Independente de suas conclusões epidemiológicas especificas, o método utilizado neste trabalho foi capaz de identificar infecção por Leishmania em flebotomíneos experimentalmente ou naturalmente infectados, sendo ferramenta útil em estudos epidemiológicos e programas de controle à Leishmaniose
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 02.06.2005

  • How to cite
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    • ABNT

      PAIVA, Byanca Regina; ANDRADE JÚNIOR, Heitor Franco. Desenvolvimento e avaliação da reação em cadeia de polimerase (PCR) na determinação da infecção por Leishmanias em flebotomíneos vetores (Diptera: Psychodidae). 2005.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2005.
    • APA

      Paiva, B. R., & Andrade Júnior, H. F. (2005). Desenvolvimento e avaliação da reação em cadeia de polimerase (PCR) na determinação da infecção por Leishmanias em flebotomíneos vetores (Diptera: Psychodidae). Universidade de São Paulo, São Paulo.
    • NLM

      Paiva BR, Andrade Júnior HF. Desenvolvimento e avaliação da reação em cadeia de polimerase (PCR) na determinação da infecção por Leishmanias em flebotomíneos vetores (Diptera: Psychodidae). 2005 ;
    • Vancouver

      Paiva BR, Andrade Júnior HF. Desenvolvimento e avaliação da reação em cadeia de polimerase (PCR) na determinação da infecção por Leishmanias em flebotomíneos vetores (Diptera: Psychodidae). 2005 ;


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