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Avaliação do efeito pleiotrópico da interleucina-12 sobre a expressão gênica de linfócitos humanos T CD4+(Jurkat E6-1) (2005)

  • Authors:
  • Autor USP: WOWK, PRYSCILLA FANINI - FMRP
  • Unidade: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBI
  • Subjects: IMUNOGENÉTICA; BIOLOGIA MOLECULAR; IMUNOLOGIA CELULAR
  • Language: Português
  • Abstract: A interleucina-12 (IL-12) é a principal molécula moduladora da resposta imune primária contra micróbios intracelulares e é a chave indutora da imunidade mediada por células que leva à resposta imune adaptativa a estes micróbios. Produzida principalmente por fagócitos mononucleares e células dendríticas, estimula a produção de IFN-'gama' nas células natural killer (NK), nos linfócitos T e a diferenciação dos linfócitos T 'CD4 POT. +' em células Th1 que produzem IFN-'gama' e também realça a função citolítica das células NK ativadas e dos linfócitos citotóxicos T 'CD8 POT. +' (CTLs). Já que a IL-12 tem efeito na indução da formação de IFN-'gama' pelas células T, é razoável pensarmos que esta interleucina poderá também modular a expressão de vários outros genes, exercendo na realidade um efeito pleiotrópico. Com o advento da tecnologia dos cDNA microarrays passamos a ter uma importante ferramenta para a identificação, de forma mais abrangente, de genes diferencialmente expressos em resposta à ação de citocinas. Com o intuito de estudarmos o efeito pleiotrópico da IL-12 em células cujo fenótipo fosse o mais próximo possível das células T auxiliares naives, utilizamos linfócitos T 'CD4 POT. +' humanos, linhagem Jurkat-E6-1, não estimulados por antígenos, porém cultivados na presença de IL-12, como sistema-modelo. As células foram cultivadas durante 6, 12 e 18 horas na presença de IL-12 em diferentes concentrações (0,1; 1 e 10 ng/ml de cultura) ou naausência da mesma (controle). Para o estudo de expressão gênica destas células, extraiu-se o RNA total que por sua vez foi convertido em DNA complementar (cDNA) total na presença do isótopo 'ANTPOT. 33 P' (sonda complexa radioativa). Preparou-se um cDNA microarray em nylon contendo 780 clones de cDNA referentes a genes relacionados ao sistema imune. Tais clones são provenientes de bibliotecas IMAGE totalmente caracterizadas. As sondas complexas foram hibridadas com o ) microarray a cujas imagens de hibridação foram atribuídos valores numéricos de quantificação, os quais foram normalizados. Com auxílio de programas de bioinformática aplicados a análise de dados de microarrays realizou-se os cálculos estatísticos e o agrupamento dos dados (genes) por meio de dendrogramas. Os resultados mostraram que a IL-12 modulou a expressão de 141 genes associados ao sistema imune nas células T 'CD4 POT. +'. Dentre os genes modulados, destacamos TNFRSF10B, SRPK2, PDCD4, BCL2-like, CALM1 e SOCS2, que representam genes "novos", ainda não descritos na literatura como modulados pela IL-12, mostrando que esta interleucina exerce um efeito abrangente nas células alvo
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 25.02.2005

  • How to cite
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    • ABNT

      WOWK, Pryscilla Fanini; PASSOS, Geraldo Aleixo Silva. Avaliação do efeito pleiotrópico da interleucina-12 sobre a expressão gênica de linfócitos humanos T CD4+(Jurkat E6-1). 2005.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2005.
    • APA

      Wowk, P. F., & Passos, G. A. S. (2005). Avaliação do efeito pleiotrópico da interleucina-12 sobre a expressão gênica de linfócitos humanos T CD4+(Jurkat E6-1). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Wowk PF, Passos GAS. Avaliação do efeito pleiotrópico da interleucina-12 sobre a expressão gênica de linfócitos humanos T CD4+(Jurkat E6-1). 2005 ;
    • Vancouver

      Wowk PF, Passos GAS. Avaliação do efeito pleiotrópico da interleucina-12 sobre a expressão gênica de linfócitos humanos T CD4+(Jurkat E6-1). 2005 ;


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