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Análise de seqüências expressas durante a fase de esporulação do fungo aquático Blastocladiella emersonii (2004)

  • Authors:
  • Autor USP: RIBICHICH, KARINA FABIANA - IQ
  • Unidade: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Subjects: FUNGOS (ESTUDO); DADOS DE SEQUÊNCIA MOLECULAR; BIOLOGIA MOLECULAR
  • Language: Português
  • Abstract: Blastocladiella emersonii é um fungo aquático da classe dos quitridiomicetos, notável pelas mudanças morfogenéticas que ocorrem durante o seu ciclo de vida. Neste trabalho isolamos 8.495 seqüências expressas (ESTs) deste fungo, que representam 3.226 seqüências únicas putativas. Destas seqüências, 37´POR CENTO´ foram classificadas segundo o processo biológico onde estariam envolvidas, de acordo com o sistema de anotação do Gene Ontology (GO). Analisamos os perfis de expressão in silico das ESTs usando estatística Bayesiana e os resultados obtidos foram validados por Northern blot para sete perfis de expressão selecionados. Pudemos encontrar boa correlação entre vários padrões de expressão e determinados processos biológicos. Foram selecionadas algumas seqüências potencialmente envolvidas com a esporulação do fungo para melhor caracterização. Analisamos a expressão de dois genes codificando centrinas (BeCen1 e BeCen2) pertencentes a subfamílias distintas. Centrinas são proteínas ligantes de cálcio envolvidas em diferentes processos como o direcionamento do aparelho flagelar e a duplicação dos centros organizadores de microtúbulos (MTOCs). Observamos que os níveis da proteína BeCen1, que não havia sido descrita em fungos, apresentam um máximo aos 150 min da esporulação, defasado do pico de expressão do seu mRNA que ocorre aos 90 min deste estágio. A proteína BeCen2 está presente em níveis constantes durante todo a ciclo de vida do fungo, embora o seu mRNAapresente um pico de expressão aos 120 min da esporulação. Experimentos de imunofluorescência localizaram a proteína BeCen1 no citoplasma e no corpo basal do zoósporo. Estes dados sugerem que BeCen1 atue na re-orientação e movimento dos corpos basais e BeCen2 na duplicação dos MTOCs. Investigamos também a expressão de dois genes codificando proteína-quinases dependentes de ciclina putativas (BeCdk1 e BeCdk2). Apenas uma Cdk (Cdk1) foi descrita em fungos como ) como diretamente envolvida no controle do ciclo celular. Ambos os genes apresentam expressão diferencial, com níveis máximos de mRNA para os dois casos aos 90 min da esporulação. Por outro lado, a proteína BeCdk1 está presente durante todo o ciclo de vida do fungo e foi localizada no núcleo e no capacete nuclear dos zoósporos. Um transportador putativo de hexose (Bemst) foi também analisado, com base na regulação por glicose de genes envolvidos com o ciclo celular observada em eucariotos. Verificou-se que os níveis do mRNA de Bemst diminuem drasticamente durante a esporulação, mas glicose ou outras hexoses não afetaram a expressão de Bemst
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 15.12.2004
  • Acesso à fonte
    How to cite
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    • ABNT

      RIBICHICH, Karina Fabiana. Análise de seqüências expressas durante a fase de esporulação do fungo aquático Blastocladiella emersonii. 2004. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2004. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-19092016-180402/. Acesso em: 25 abr. 2024.
    • APA

      Ribichich, K. F. (2004). Análise de seqüências expressas durante a fase de esporulação do fungo aquático Blastocladiella emersonii (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-19092016-180402/
    • NLM

      Ribichich KF. Análise de seqüências expressas durante a fase de esporulação do fungo aquático Blastocladiella emersonii [Internet]. 2004 ;[citado 2024 abr. 25 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-19092016-180402/
    • Vancouver

      Ribichich KF. Análise de seqüências expressas durante a fase de esporulação do fungo aquático Blastocladiella emersonii [Internet]. 2004 ;[citado 2024 abr. 25 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-19092016-180402/

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