Efeito do ácido linoléico conjugado trans-10, cis-12 na regulação da lipogênese e expressãoi gênica em culturas de tecido adiposo de suínos em crescimento (2005)
- Authors:
- Autor USP: JOSE, ANDREA ALESSANDRA FILOMENA BRASIL VIEIRA - ESALQ
- Unidade: ESALQ
- Sigla do Departamento: LZT
- Subjects: ÁCIDOS GRAXOS; CULTURA DE TECIDOS ANIMAIS; EXPRESSÃO GÊNICA; METABOLISMO ANIMAL; SUÍNOS; TECIDO ADIPOSO
- Language: Português
- Abstract: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do ácido linoléico conjugado (CLA), especificamente do isômero trans-10, cis-12 em culturas de explante de tecido adiposo de suínos, em crescimento. Respostas foram avaliadas para a lipogênese, lipólise, abundância do RNA mensageiro da enzima sintase de ácido graxo (FAS) e atividade de enzimas lipogênicas. Como a adição de CLA ao meio de cultura necessita de uma molécula carreadora, um ensaio preliminar teve como objetivo testar o uso da albumina sérica bovina (BSA) e validar a sua substituição por poliivinil álcool (PVA), avaliando seu efeito no sistema de cultura. Explantes de tecido adiposo de nove suínos, em crescimento, (78±3 kg) foram submetidos à cultura em meio 199 (com adição de 100 ng/mL de insulina, 10 nM de dexametasona e antibióticos) por 4, 12, 24 e 48 horas, com os tratamentos: Controle - meio 199; PVA - meio 199 com 100 M de PVA e pGH - meio 199 com 100 ng/mL de pGH (hormônio do crescimento suíno) e 100 M de PVA. Após cada período de cultura, explantes foram coletados para determinação da lipogênese pela incorporação de glucose-14C por 2 h com e sem adição de insulina. Após 48 h, a taxa de lipólise foi avaliada pela liberação de ácidos graxos não esterificados (AGNE) por 2 horas com e sem isoproterenol. Nos ensaios preliminares, foram utilizadas diferentes fontes comerciais e lotes de BSA, que provocaram alterações nas taxas lipogênicas, provavelmente pela presença de outras substânciascontaminantes. Diferentemente da BSA, o PVA não teve efeito sobre a síntese de lipídios como na resposta à insulina. No meio com PVA, o controle positivo (pGH) diminuiu a incorporação de glucose em lipídios (P<0,01) mantendo a resposta da insulina (P<0,05). Para a lipólise, também, não houve diferença entre Controle e PVA e o controle positivo (pGH) aumentou a lipólise basal e estimulada por isoproterenol (P<0,05), conforme o esperado. O PVA, ao contrário da BSA, (continua) ) se mostrou um carreador para o tratamento que não apresenta efeitos sobre os parâmetros de lipogênese e lipólise. Desta forma, no estudo do CLA, o PVA foi utilizado ao invés da BSA, no meio de cultura. Os tratamentos foram: Controle - meio 199 com 100 M de PVA; CLA200 - 200 M de CLA trans-10, cis-12; CLA50 - 50 M de CLA trans-10, cis-12; LA - 200 M de ácido de linoléico e pGH - 100 ng/mL de pGH e 100 M de PVA. Os ácidos graxos foram complexados ao PVA (2:1). Após 4, 12, 24 e 48 h de cultura, nos meios acima, os explantes foram coletados e submetidos ao ensaio de lipogênese. Após 24 h de cultura, o RNAm da FAS foi quantificado por RT-PCR em Tempo Real. A lipólise e atividade das enzimas FAS, glucose 6-fosfato desidrogenase, 6-fosfogluconato desidrogenase e NADP-malato desidrogenase, foram avaliadas após 48 horas. A incorporação de glucose basal e estimulada diminuiu (P<0,05) e a lipólise basal e estimulada aumentou (P<0,05) com o tratamento com pGH, conforme esperado. O ácido linoléiconão alterou nenhum dos parâmetros avaliados. O CLA na dose maior (200 M) reduziu a atividade da FAS (P<0,05), mas a redução observada na lipogênese não foi significativa. Coerente, com as reduções na atividade da FAS e na lipogênese, os níveis de RNAm da FAS diminuíram com o tratamento com CLA na dose mais elevada. Enzimas da síntese de NADPH não foram afetadas pelos tratamentos. O tratamento com CLA, nas duas doses, não causou efeito na taxa de liberação de AGNE após 48 h de cultura. Estes dados sugerem que CLA trans-10, cis-12 tem efeito sobre o sistema envolvido na lipogênese, mas não sobre a lipólise
- Imprenta:
- Publisher place: Piracicaba
- Date published: 2005
- Data da defesa: 27.04.2005
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ABNT
JOSÉ, Andrea Alessandra Filomena Brasil Vieira. Efeito do ácido linoléico conjugado trans-10, cis-12 na regulação da lipogênese e expressãoi gênica em culturas de tecido adiposo de suínos em crescimento. 2005. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2005. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08022006-143005/. Acesso em: 30 set. 2024. -
APA
José, A. A. F. B. V. (2005). Efeito do ácido linoléico conjugado trans-10, cis-12 na regulação da lipogênese e expressãoi gênica em culturas de tecido adiposo de suínos em crescimento (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08022006-143005/ -
NLM
José AAFBV. Efeito do ácido linoléico conjugado trans-10, cis-12 na regulação da lipogênese e expressãoi gênica em culturas de tecido adiposo de suínos em crescimento [Internet]. 2005 ;[citado 2024 set. 30 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08022006-143005/ -
Vancouver
José AAFBV. Efeito do ácido linoléico conjugado trans-10, cis-12 na regulação da lipogênese e expressãoi gênica em culturas de tecido adiposo de suínos em crescimento [Internet]. 2005 ;[citado 2024 set. 30 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-08022006-143005/
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