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Caracterização de clones que codificam membros da família multigênica Tc-85 de Trypanosoma cruzi (2004)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: OLIVEIRA, DEBORA ROSE DE - IQ
  • Unidades: IQ
  • Sigla do Departamento: QBQ
  • Subjects: BIOLOGIA MOLECULAR; EXPRESSÃO GÊNICA
  • Language: Português
  • Abstract: As formas tripomastigotas do Trypanosoma cruzi expressam as Tc-85, glicoproteínas de superficie. A Tc85-11, um dos membros da família da Tc-85, foi caracterizado como uma proteína de adesão, com os sítios de ligação a laminina e citoqueratina 18 localizados, respectivamente, nos domínios amino e carboxi-terminal. Utilizando-se primers consensos, um produto de cerca de 2000 pb foi amplificado do cDNA de formas tripomastigotas de T. cruzi da cepa Y. Uma biblioteca enriquecida em membros da família da Tc-85 foi construída utilizando-se esses primers e o plasmídeo pCR T7/NT Topo Cloning (Invitrogen). O sequenciamento de cerca de 60 clones resultou em 30 ORFs completas. O sequenciamento de DNA foi realizado com o método dideoxi de terminação de cadeia e as seqüências foram analisadas. Por análise comparativa, identidades de 40-90´POR CENTO entres os clones sequenciados e 30-70´POR CENTO` com membros da superfamília de proteínas das gp85/trans-sialidases foram encontradas. Os dados foram compilados nas seguintes ferramentas: ORF finder (NCBI), Cap3, Smith-Waterman, ClustalW, BioEdit e BLASTX/BLASTN (NCBI). Para a análise filogenética, foi utilizado o programa Paup empregando máxima parsimônia (MP), "neighbor joining" (NJ) e máxima probabilidade (MP). A árvore possuia dois grupos e foi submetida a análise de bootstrapping, com busca heurística completa e com 100 e 500 repetições. Os mesmos dois grupos apareceram quando a comparação de seqüências e análise filogenéticaforam correlacionadas. Em experimentos utilizando-se elementos de matriz extracelular - laminina e fibronectina - foi testada a ligação de proteínas recombinantes purificadas. A proteína codificada pelo inserto de cDNA Tc85-45 foi capaz de se ligar de maneira saturável a laminina e a fibronectina, mas não a albumina e gelatina. Os dados sugerem fortemente que, apesar da família da Tc-85- e por conseqüência a superfamília das gp85/trans-sialidases - )- codificarem proteínas com graus variáveis de seqüências similares, as seqüências específicas de peptídeos para a ligação a diferentes moléculas de matriz e receptores celulares variam entre membros da família, constituindo, assim, uma família multiadesiva de glicoproteínas que capacita o parasita a ultrapassar as barreiras impostas pelas membranas celulares, matrizes extracelulares e lâminas basais.
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 28.09.2004

  • How to cite
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    • ABNT

      OLIVEIRA, Débora Rose de; ALVES, Maria Júlia Manso. Caracterização de clones que codificam membros da família multigênica Tc-85 de Trypanosoma cruzi. 2004.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2004. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11112014-130658/pt-br.php >.
    • APA

      Oliveira, D. R. de, & Alves, M. J. M. (2004). Caracterização de clones que codificam membros da família multigênica Tc-85 de Trypanosoma cruzi. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11112014-130658/pt-br.php
    • NLM

      Oliveira DR de, Alves MJM. Caracterização de clones que codificam membros da família multigênica Tc-85 de Trypanosoma cruzi [Internet]. 2004 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11112014-130658/pt-br.php
    • Vancouver

      Oliveira DR de, Alves MJM. Caracterização de clones que codificam membros da família multigênica Tc-85 de Trypanosoma cruzi [Internet]. 2004 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-11112014-130658/pt-br.php

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